Hangi kalitede embriyolar nakil için uygundur? Embriyo Transferi Öncesi Öneriler

uygulandığında geleneksel yöntemler hayvanların ıslahı ve seçimi, yüksek genetik potansiyelden tam olarak yararlanılamaz, hayvan popülasyonunun genetik iyileştirme sürecinde keskin bir hızlanma sağlayacak temelde yeni bir ıslah çalışması sistemine ihtiyaç vardır. Biyoteknolojik üreme yönetimi yöntemlerine dayanmalıdır. Hayvanların hızlandırılmış kontrollü üremesi, doğal tohumlama sırasında gerçekleştirilmeyen rezerv üreme ve üretkenlik potansiyellerinin maksimum kullanımına izin verir.

Biyoteknik tekniğin hayvancılık pratiğine girmesiyle - suni tohumlama yöntemi - yetiştiriciler, değerli üreticilerin üreme sürecine katılımını yönlü olarak düzenleme, sürünün hızlı niteliksel gelişimi için bunları yoğun bir şekilde kullanma becerisini edinmişlerdir. büyük bir ölçek. Bununla birlikte, kadınların üreme sürecine katılımı önemsiz kalmaktadır. Dolayısıyla, bir ineğin verimli yaşamı için, ne kadar üretken olursa olsun, ondan normal yolla 10'dan fazla buzağı elde edilemez. Bu gösterge, rekor kıran ineklerin enerji, üretken ve kalıtsal potansiyelini tam olarak kullanmanızı sağlayan embriyoların nakli (nakli) ile artırılır.

Bu yöntemin özü, klinik, biyoteknik ve laboratuvar tekniklerinin süperovülasyonu (değerli kadın donörlerde yumurtlama sayısında yapay artış, ardından bunların erkek geliştiricilerin spermleriyle tohumlanması, ekstraksiyonu (yıkama)) sağlamak için tutarlı bir şekilde uygulanmasında yatmaktadır. gelişimin erken aşamalarındaki embriyolar ve bunların transferi (transplantasyon). ) bir erkek üretici ve bir kadın donörün yüksek üreme ve üretkenlik özelliklerini birleştiren bir transplant yavru elde etmek için değerli dişi alıcıların genital yoluna). Embriyo transferi suni tohumlama yönteminin yerine geçmez, sadece onu tamamlar.

İlk embriyo nakli, 1890'da, tavşanların vücudundan çıkarılan birkaç zigotu başka bir cinsin dişilerine nakleden ve tam teşekküllü yavrular alan İngiliz bilim adamı W. Heap tarafından gerçekleştirildi. Daha sonra, Rus doktor M. Ona-nov (1891), Kazan jinekoloğu V.S. Gruzdev (1897), Pincus (1936) 1931'de Warwick ve Berry koyun ve keçilerde embriyo nakli gerçekleştirdiler. 1980'lerde Dişi bir yumurtanın vücudu dışında döllenmeyi başaran ve yapay bir beşiğe yerleştirilmiş bir insan embriyosunun gelişimini iki aylık olana kadar izleyen İtalyan doktor Petrucci'nin sansasyonel deneyleri yaygın olarak biliniyordu.

Ülkemizde embriyo nakli denemelerine devam edildi. Koyunlarda zigot nakli ile ilgili ilk deneylerden biri, Sovyet biyolog A.I. Lopirin (1949-1952). 1950 lerde A. V. Kvasnitsky, domuzlarda zigot nakli üzerine deneyleri başarıyla gerçekleştirdi. Üzülerek belirtmek isteriz ki, bu bilim adamlarının yürüttüğü araştırma, yabancı bilim adamlarının önüne geçmiştir. bilimsel seviye o yıllar, daha sonra taviz vermediği için askıya alındı.

Koyunlarda süperovulasyon yöntemi kullanılarak zigot nakli ile ilgili ilk deneyler 1955 yılında İngiliz bilim adamları G.L. Edward ve L.E. Rawson. 1961'de Rawson, "canlı kuluçka makineleri" - tavşan yumurtası kanalları kullanarak koyun zigotlarının uçakla 6 bin millik bir mesafeye transferini gerçekleştirdi.

1931'de Hartman ilk kez katledilen bir ineğin yumurta kanallarından canlı embriyolar elde etti; 1951'de E.L. Willet ve diğerleri, 8-12 blastomer aşamasında beş zigot naklinden sonra ilk ve 1953'te iki buzağı aldı. Bu araştırmacıların sonraki çabaları, çoklu ovulasyon (poliovülasyon) için yöntemler geliştirmeyi, tam teşekküllü embriyoların verimini artırmayı, embriyoları vücut dışında kültürlemek ve oositleri döllemek için yöntemler geliştirmeyi amaçlıyordu.

1970'lerin başında birikmiş. deneyimler, embriyo transferinin laboratuvardan hayvancılık pratiğine aktarılabileceğini göstermiştir. Embriyo nakli yönteminin, çoklu ovulasyonu indükleme tekniği ile birleştirildikten sonra pratik anlam kazandığını not etmek yerinde olacaktır. 1970'ler Bu yöntemin, yüksek oranda buzağı nakli elde etmekle uğraşan firmaların ortaya çıktığı bazı ülkelerde (İngiltere, ABD, Kanada, Almanya, Avusturya, Yeni Zelanda, Çekoslovakya, Macaristan) pratik uygulamasının başlangıcı ile işaretlendi. üretken inekler.

Bu yöntemin ilk olarak 1983 yılında kullanıldığı Fransa'da embriyo (zigot) nakli teknolojisinde önemli ilerlemeler kaydedilmiştir. Çoğunluğu besicilik koşullarında olmak üzere 3.3 bin embriyo transferi yapılmış, aynı zamanda 1 binden fazla embriyo transferi gerçekleştirilmiştir. donmuş halde saklanır.

Embriyo nakli, embriyo transfer sayısının yılda 100.000'i aştığı ABD ve Kanada'da maksimum pratik kapsamına ulaştı. Daha 1988'de, bu ülkelerdeki sığırlar için suni tohumlama merkezlerinde 1.000'den fazla nakledilen boğa vardı.

Kapitalist ülkelerdeki çiftçiler, embriyo nakli yöntemini takdir ettiler ve embriyo transferlerinin yüksek maliyetine (2.000 ABD dolarına kadar) rağmen, onları yetiştirme programlarına isteyerek dahil ediyorlar. ABD müzayedelerinden birinde, bir Holstein-Friesian nakil danasının 130.000 $ değerinde olduğuna dair bir rapor var.

cumhuriyetlerde eski SSCB ilk nakil buzağı 1975'te alındı, ancak 2 binden fazla nakil buzağı alındığında, embriyo nakli yönteminin hayvancılık pratiğine girişinin başlangıcı olarak kabul edilmelidir.

Embriyo nakli, hayvancılıkta ilerlemeyi yoğunlaştırmanın etkili bir yolu olan, yönlendirilmiş sürü üreme yönetiminin temelde yeni bir biyoteknik yöntemidir. Transplantasyon yöntemi, yüksek (rekor) verimlilik, maksimum yavru sayısı ile ayırt edilen dişilerden elde etmek için dişilerin potansiyel doğurganlığından daha fazla yararlanmayı mümkün kılar ve bu nedenle anaçları tamamlar ve Üreticilerin sadece seçkin hayvanlarla hayvancılık yapması. Bu, istenen özelliklere göre hayvan seçimini önemli ölçüde hızlandırır, bir çift rekor kıran ebeveynden gelen yüksek verimli hayvanlardan oluşan homojen bir sürünün oluşturulması için ön koşulları oluşturur. Bu, bir sürü oluşturmak için gereken inek sayısını önemli ölçüde artırabilir.

Genellikle, tedavi başına bir donör inekten en fazla beş buzağı elde edilir. Verici inek yıl içinde 2-5 kez kullanılırsa bu süre zarfında ondan 6-10 ila 20-25 buzağı elde edilebilir. Görünüşe göre sadece 20 rekor kıran inekle,

200 başlı bir ikame sürü oluşturmak için, normal şartlarda aynı ineklerden aynı süre içinde 10'dan fazla buzağı elde edilmez. Bu nedenle embriyo nakli, yüksek verimli hayvanların, özellikle nadir ırkların, genetik olarak benzersiz bireylerin hızlı üremesi için umut verici bir yöntemdir.

Embriyo nakli, yoğun cinsel kullanımın başlangıcında öz kardeşlerinin (kardeşlerinin) üretkenliği ile değerlendirilebilen değerli bir anneden önemli sayıda erkek evlat elde edilmesine yardımcı olur. Bu bağlamda birçok ülkede embriyo transplantasyonunun temel amacı hayvanların suni tohumlama ağında kullanılmak üzere seçkin ineklerden boğa elde etmektir.

Böylece embriyo nakli, suni tohumlama işletmelerinin satın alınması için erkek geliştiricilerin seçilmesinin etkinliğini önemli ölçüde artırır.

Gelecekte, embriyo nakli yöntemi, nadir ve nesli tükenmekte olan hayvan türlerinin gen havuzunu korumanın ve çoğaltmanın bir yolu olabilir. Kullanımı, ülkeler arasında gen havuzunun değişimini kolaylaştırır: ulaşım sorunu yoktur, karantina önlemlerine ihtiyaç vardır, ırkların ve melezlerin iklime alışması kolaylaştırılır, bu nedenle, dünyanın genetik kaynaklarının kullanım olanakları genişlemektedir. Bazı ülkelerde, nakil sonucu doğan hayvanlar soy kitaplarına kaydedilir. Bu nedenle çiftlik hayvanlarının dondurulmuş embriyoları ihracat ve ithalata konu olmaktadır.

Sığır yetiştiriciliğinde, ikizler elde ederek doğurganlığı artırmak için transplantasyon yöntemi kullanılabilir: iki embriyonun bir alıcıya (her iki boynuzda) nakledilmesi veya zaten döllenmiş bir hayvanın serbest boynuzuna bir embriyonun ek nakli (yeniden dikilmesi).

Embriyo transplantasyonunun, hayvanların üreme işlevinin çeşitli yönlerini, endo ve eksojen faktörlerin birçoğu üzerindeki etkisini incelemek için temel oluşturabileceği dikkate alınmalıdır. Araştırmanın sonucu (fizyolojik-biyokimyasal, genetik, histolojik, immünolojik, mikrobiyolojik, jinekolojik vb.), yöntemin daha da geliştirilmesi için temel oluşturacaktır.

Lösemi, mastitis vb. hastalıklara dirençli hayvanlar donör olarak kullanılarak yavrulara bu hastalıklara karşı belirli bir immünolojik direnç aktarılabilir. Bu bakımdan süt sığırı yetiştiriciliğinde löseminin embriyo nakli yardımıyla yok edilmesi fikri oldukça caziptir. Batı Alman uzmanlar, enfekte donörlerden bile embriyo nakli yöntemi kullanılarak sağlıklı yavruların elde edilebileceğine inanıyor.

Yukarıdakilerin ışığında, embriyo transplantasyonunun yüksek verimli hayvanlardan oluşan bir sürünün üremesini yoğunlaştırmak için umut verici bir yöntem olduğu açıktır. maksimum kullanım olağanüstü rekor kıran hayvanların genetik potansiyeli. Ancak, aşağıdakiler dikkate alınmalıdır.

İlk olarak, embriyo nakli yalnızca genetik olarak değerli hayvanların donörleri ve üreticileri olarak kullanıldığında, yavruların kalitesi açısından test edildiğinde ve iyileştiriciler olarak kabul edildiğinde etkilidir.

İkincisi, transplantasyonun başarısı büyük ölçüde donörlerin ve alıcıların kalitesine ve sağlık durumuna (genital organların durumu dahil) bağlıdır; yöntemin etkinliği, araçlar, hayvanların hormonal tedavi şemaları, içlerinde süperovülasyonun ortaya çıkmasına katkıda bulunur; donörlerin hormonal tedavilerine karşı reaktivite (hassasiyet) seviyesi ve uyarılmış süperovülasyon derecesi; donörlerin döllenmesinde kullanılan sperm üreticilerinin kalitesi ve yumurtlanmış yumurtaların doğurganlığı; embriyoların yıkanmasının eksiksizliği, uygulanan embriyo yetiştirme ve vücut dışında depolama yöntemlerinin etkinliği; alıcılara embriyo transferi yönteminin mükemmelliği; donörlerde ve alıcılarda cinsel işlevin senkronizasyonu; embriyoların aşılanması ve alıcının meyve verme yeteneği.

üçüncüsü, olumlu taraflar Embriyo naklinin hayvancılıkta kullanımı ancak tam besleme, uygun bakım, donörlerin ve alıcıların rasyonel kullanımı, ikame genç hayvanların yoğun hedefli yetiştirmesi, çiftlikte planlı hedefli seçim ve ıslah çalışmalarının gerçekleştirilmesi ile kendini tam olarak gösterebilir. hayvanların ekonomik olarak yararlı özellikler kompleksine göre, hayvanların düzenli obstetrik ve jinekolojik tıbbi muayenelerinin sonuçlarına dayalı olarak üreme sürüsünün kısırlığının önlenmesi ve ortadan kaldırılması için planlı önlemlerin sistematik olarak uygulanması, akıcı bir şekilde bilgi sahibi olan yüksek nitelikli uzmanların varlığı yöntemi kullanırken rahat bir oda, uygun ekipman, reaktifler ve müstahzarlar sağlayarak embriyo transplantasyonu teorisi ve pratiği.

Embriyo nakli yönteminin etkinliğinin garantörü, kesinlikle bilimsel bir temelde, teknolojik gerekliliklere sıkı sıkıya bağlı kalarak uygulanmasına yönelik makul bir yaklaşımdır.

Dişilerde hayvan gelişiminin embriyonik döneminde ortaya çıkan üreme organları, ergenlik çağının başlamasıyla birlikte fonksiyonel aktivitelerini gösterir. Dişilerde ergenliğin başlamasıyla (düvelerde - 6-12'de, kısraklarda - 18'de, domuzlarda - 5-8'de, koyunlarda - 5-8 ayda), yumurtalıklarında foliküller olgunlaşır, endokrin arka plan değişir , tohumlama, döllenme ve hamilelik için uygun koşullar yaratmayı amaçlayan üreme organlarında karşılık gelen morfolojik ve fonksiyonel değişikliklerin yanı sıra hayvanların davranışında ve cinsel aktivitesinde değişikliklere eşlik eder. Dişinin üreme yaşamı boyunca bir yumurtlamadan diğerine belirli bir sırayla tekrarlanan bu değişikliklere (dönüşümlü belirgin cinsel aktivite ve göreceli dinlenme) cinsel döngü denir.

A.P.'nin öğretilerine göre. Öğrencinin cinsel döngüsü üç aşamadan oluşur: uyarma, engelleme ve dengeleme. Uyarma aşaması, birbiriyle ilişkili dört aşama (fenomen) ile karakterize edilir:

• 1) sıcakta ( östrus)- genital organlarda morfofonksiyonel değişiklikler (hiperemi, vulvanın şişmesi, vajinanın mukoza zarı ve antresi, serviksin görünen kısmı, servikal kanalın açılması, genital organlardan mukus akışı ile kendini gösterir) dışarıda);
• 2) vücudun genel reaksiyonu - uyarma ( reaksiyon)- kaygı, diğer dişilerin üzerine atlama, iştah ve üretkenlikte azalma ile kendini gösteren dişi davranışında bir değişiklik;
• 3) cinsel avlanma ( cinsel dürtü)"hareketsizlik refleksi" olarak kendini gösteren, dişinin erkeğe karşı olumlu bir cinsel tepkisi;
• 4) yumurtlama ( yumurtlama) - folikülün olgunlaşmasının tamamlanması, olgun bir yumurtanın ondan yumurta kanalına salınmasıyla kırılması.

Bu fenomenler, birbiri üzerine katmanlanarak belirli bir sırayla ortaya çıkar. Uyarma aşamasının belirtilen aşamalarının oluşum ve tezahür zamanının özellikleri dikkate alındığında, cinsel döngüler senkronizedir (eğer tüm fenomenlerin tezahürü zamanı çakışırsa) ve asenkrondur (eğer başlangıç ​​​​ve bitiş zamanı ise) uyarma aşamasının bireysel aşamalarının tezahürü çakışmaz). Dişinin fizyolojik durumuna, beslenme, bakım ve sömürü koşullarına bağlı olarak, cinsel döngüler tamamlanabilir (uyarma aşamasının tüm aşamaları iyi ifade edilir, zamanında ortaya çıkar) veya daha düşük (belirli bir fenomen olduğunda) olabilir. meydana gelir) - anestral, areaktif, alibid veya anovulatory.

İnhibisyon aşamaları, cinsel uyarılma belirtilerinde bir artış ile karakterize edilir. Dengeleme aşaması, kendini görece cinsel dinlenmede gösteren, uyarma ve engelleme süreçleri arasındaki dinamik bir denge ile karakterize edilir.

Cinsel döngülerin belirli özellikleri aşağıdaki verilerden değerlendirilebilir. Buzağılama sonrası ineklerde uyarma aşaması 18-25 gün sonra ortaya çıkar ve 2-5 gün sürer. Uyarma aşamasının oluşumu:

• önce östrus belirtileri vardır;
• sonra (2-4 gün sonra) cinsel uyarılma;
• 4-15 saat sonra devam eden avlanma olgusu ortaya çıkar.

10-13 ila 17-23 saat (ortalama 16 saat);

Yumurtlama, avın bitiminden 10-15 saat sonra gerçekleşir.

Cinsel döngülerin süresi 18-22 gündür (ortalama

Koyunlarda, beslenme ve bakım için uygun koşullar altında, uyarma aşaması doğumdan sonraki 1 ay içinde ortaya çıkabilir, ancak daha sık olarak belirli bir mevsimde (Ağustos-Mart) kendini gösterir. Uyarma aşaması 3-6 gün sürer. Östrus ve genel bir reaksiyonun arka planına karşı, koyun ırkına bağlı olarak devam eden eşzamanlı olarak avlanma ortaya çıkar: 38-40 saat arası - Askani koyunlarında, ince yapılı, Karakul, Koridel, Gemshire, kürk manto ırkları, Kuzey Kafkasya'nın Merinos koyunlarında olduğu gibi; 41-70 saate kadar - Romanov cinsi koyunlarda (koyunlarda - 46 saat, yetişkin hayvanlarda - 59 saat). Yumurtlama esas olarak 27-31 saat sonra (Romanov koyunları için - 36 saat sonra) ortaya çıkar ve avın başlamasından 30-36 saat sonra (Romanov koyunları için 52 saate kadar uzar) sona erer. Çoğu hayvanda foliküller 44. ve 49. saatler arasında yumurtlar.Cinsel döngünün süresi 14-19, daha sıklıkla 14-17 gündür.

Kısraklarda, uyarma aşaması doğumdan sonra 5., daha sık olarak 7-12. Günde gerçekleşir ve 6-12 gün sürer. Östrus ve genel reaksiyonun arka planına karşı, 2-12 gün süren avlanma ortaya çıkar (genç kısraklarda - 4-5'e kadar, orta yaşlı kısraklarda - 5-7, yaşlı kısraklarda - 7-12 gün). Yumurtlama genellikle östrusun en çarpıcı tezahürünün, cinsel uyarılmanın ve avlanmanın zamanına denk gelir, ikincisinin sonunda meydana gelir, cinsel döngünün süresi ortalama 20-21 gündür.

Bir domuzda, uyarma aşamasının varlığı için uygun koşullar altında, doğumdan sonraki 1 ay içinde, daha sık olarak sütten kesilen domuz yavrularından sonra ortaya çıkabilir. Uyarma aşaması eşzamanlı olarak (östrus, cinsel uyarılma ve avlanma 24 saat içinde birbiri ardına ortaya çıkar) ve eşzamansız olarak (bireysel fenomenlerin tezahürü arasında 24-77 saat geçer) oluşur. Kızgınlık ve genel reaksiyon genellikle 3-4 gün sürer. Çoğu dişi domuzda av, uyarma aşamasından 1 gün sonra başlar ve onarım domuzları için sürer - ana kraliçeler için ortalama 40 saat - 50-54 saat Yumurtlama genellikle kızgınlığın 2. gününde (ortalama olarak, 24 saat sonra) gerçekleşir. ) ve 1-3 ila 24-48 saat (genellikle 10-12 saat) arasında sürer.

Hayvanlarda üreme süreci tohumlama ile başlar, yani. erkek sperminin kadın genital sistemine girmesi. Hayvanların doğal döllenmesi - dişilerde ve erkeklerde doğuştan cinsel reflekslerin tezahürü nedeniyle cinsel ilişki (koitus) mümkün hale gelir: sarılma, çiftleşme, ereksiyon, boşalma. Şu anda, hayvanların üremesi, suni tohumlama yönteminin toplu uygulamasına dayanmaktadır.

Optimal tohumlama zamanını seçerken, dişilerin üreme aparatında spermin (24-48 saate kadar) ve yumurtlamadan sonra yumurtaların (4-6 saate kadar) dölleme kabiliyetinin canlılığı ve korunması açısından, olgunlaşma için gereken süre sperm kanalı (en az 6 saat) ve yumurtalar (2 saate kadar) ve ayrıca cinsel döngünün belirli özellikleri. Tohumlama, ovulasyon oluşmadan önce sonda erkek tarafından tespit edilen östrus fazında yapılmalıdır. Döllemenin etkili olabilmesi için, dişi genital yoluna enjekte edilen dozun, yumurtayı dölleyebilecek optimal miktarda aktif sperm hücresi içermesini sağlamak gerekir; farklı hayvan türlerinde farklıdır. Farklı türlerdeki hayvanların suni tohumlama yöntemini seçerken, doğal tohumlamalarının türü dikkate alınır. Vajinal tipte doğal tohumlama (inekler, düveler, koyunlar) olan hayvanlar için, servikal suni tohumlama yöntemi kullanılır; uterin tipte tohumlama ile hayvanların suni tohumlanması, uygun aletler kullanılarak uterin yöntemle gerçekleştirilir.

İnseminasyon, bir dizi katkıda bulunan faktörle birleştiğinde, spermin yumurta kanalının üst üçte birlik kısmında yumurta ile buluşmasını ve döllenmeyi, yani döllenmeyi sağlar. yumurta ve spermin füzyonundan oluşan fizyolojik bir süreç, ardından karşılıklı asimilasyon ve disimilasyon, bunun sonucunda niteliksel olarak yeni bir hücre oluşur - çift kalıtıma (babaya ait) sahip tam (diploid) bir kromozom setine sahip bir zigot ve anne). Hayvanlarda döllenme birkaç aşamadan oluşur: soyma (yumurtanın parlak taçtan serbest bırakılması - sperm hiyalüranidazının etkisi altındaki foliküler hücreler), şeffaf zardan ve safra boşluğundan spermin penetrasyonu, spermin sitoplazmaya girmesi yumurta sarısı zarından geçen yumurta ve her birinde yarım ( haploid) kromozom seti bulunan iki pronükleus oluşumu, pronükleusların füzyonu.

Ortaya çıkan zigot, daha fazla gelişme için güçlü bir uyarı alır ve blastomer sayısındaki artışla hızla parçalanmaya başlar. Zigotun çekirdeği yaklaşık 24 saatlik aralıklarla ikiye, dörde, sekize vb. bölünür. blastomerler. İnek zigotunun bölünmesi yaklaşık 8 gün sürer. İlk 2-4 gün yumurta kanalında ve daha sonra rahim boynuzlarından birinde ezilme meydana gelir. Yaklaşık 4-5. Günde, ezici blastomerler yoğun bir hücre grubu (16-32) oluşturur - dış katmanı (trofoblast) hızla bölünen küçük hafif blastomerlerden oluşan ve iç katmanı (embriyoblast) oluşan erken bir morula. yavaş bölünen blastomerlerden oluşur. 5-7. günlerde, 32-90 blastomerden oluşan geç bir morula oluşur ve 7-8. günlerde, trofoblast ile embriyoblast arasında sıvıyla dolu bir boşluk oluşur - bu, 80-120 blastomer içeren erken bir blastosisttir. 19. günde blastokist, ekstraembriyonik zarları olan bir embriyoya dönüşür. Embriyonun rahim mukozasına tutunması koyunlarda 18-20 gün, sığırlarda 18-21 gün, domuzlarda 11 gün sonra gerçekleşir.

Döllenme anından itibaren embriyonik dönem başlar ve sürer: ineklerde - 60 gün, koyunlarda - 48 güne kadar, domuzlarda - 38 gün. Şu anda, organların döşenmesi, fetal zarların oluşumu. Doğumdan önceki günler - fetal dönem; bu sırada organların büyümesi gerçekleşir, vücudun oluşumu tamamlanır.

Yeni bir organizmanın intrauterin gelişimi, dişinin, döllenme anından başlayan - son (verimli) tohumlamanın günü olan ve olgun bir fetüsün doğumuyla sona eren, hamilelik adı verilen, meyve vermeyle ilişkili özel bir fizyolojik durumunu belirler. embriyo ve fetüsün normal gelişimini sağlayan metabolizma, hematolojik ve hormonal durum, tüm fizyolojik kadın vücut sistemlerinde morfofonksiyonel değişiklikler kompleksi ile karakterize edilir. Sonuç olarak, hamileliğin normal seyri, karşıtların birbirine bağlanması olan diyalektik birlik ile sağlanır: anne organizması ve intrauterin gelişen birey. Bu birliğin ihlali, kürtaja yol açar - hamileliğin erken sonlandırılması. Tüm işlevlerin geriliminin doğasında bulunan hamile kadınların optimal beslenme, bakım ve sömürü modu, fizyolojik bir gebeliğin patolojik bir gebeliğe geçişini önlemek için sağlıklı bir yavrunun doğumunu teşvik etmek için tasarlanmıştır.

Hayvan üremesinin yönlendirilmiş düzenlemesi, cinsel süreçlerin nörohumoral düzenlemesinin özelliklerinin bilgisine dayanmalıdır.

Cinsel döngülerin ritmi, aşamaların ve evrelerin (fenomenler) sırası ve karşılıklı ilişkisi, vücudun sinir ve hümoral (endokrin) sistemlerinin etkileşimi ile açıklanır. Cinsel döngülerin ortaya çıkması ve tezahürü için gerekli bir koşul, iki hormon grubunun varlığıdır:

• 1) hipofiz bezi tarafından ve hamilelik sırasında - ayrıca plasenta tarafından üretilen gonadotropik - folikül uyarıcı (FSH), luteinize edici (LH) ve luteotropik (LTH) veya laktojenik;
• 2) olgunlaşan foliküllerde oluşan yumurtalıklarda üretilen gonodal veya yumurtalık - foliküler (folikülin) veya östrojenik (üç tip östrojen bilinmektedir: estron, estradiol, estriol, ikincisi en aktif olan), ve progestron - korpus luteumun hormonu . Diğer endokrin bezlerin hormonları (adrenal bezler, tiroid bezi, timus) cinsel süreçlerin düzenlenmesinde rol oynar. Tüm hümoral sistem, serebral korteksten birincil uyarılar alır.

İçsel olanlara ek olarak yeni bir döngünün oluşumu ve tezahürü de dış faktörlerden etkilenir: yiyecek, ışık ve erkek çok önemlidir. Yiyecekle birlikte, steronlar ve vitaminler, güneşlenmenin etkisi altında folikül benzeri maddelerin sentezlendiği hayvan vücuduna girer; erkeğin dişi üzerindeki etkisi için uygun bir arka plan oluştururlar.

Çevresel faktörlerin tahrişi, gözlerin, cildin, sindirim sisteminin ve diğer organların reseptörleri ile koku alma, görsel, işitsel, dokunsal (dokunsal) analizörler tarafından algılanır, iletildiği merkezcil sinirler yoluyla serebral kortekse girer. santrifüj yollardan hipotalamusa ulaşır. Burada, kan yoluyla hipofiz bezine etki eden bir nörosekret (salgılayıcı faktör) oluşur.

Arka hipofiz bezi, hipofizini üretir (ana işlevi ayrılmaz parça genital sistemin ve memenin düz kaslarının kasılma aktivitesini artıran oksitosindir). Hipotalamusun nörosekresyonu ayrıca hipofiz bezini (ön lobu), kana girişi yumurtalıklardaki foliküllerin gelişmesine ve olgunlaşmasına neden olan FSH'nin salınmasına uyandırır. Bir veya daha fazla folikülün olgunlaşmasına, beynin kemoreseptörleri ve analizörleri yoluyla östrus, genel uyarılma ve avlanmaya neden olan östrojen oluşumu eşlik eder. Büyük miktarda östrojen varlığı, FSH salgılanmasını engeller ve aynı anda ön hipofiz bezi LH ve LTH'nin salınmasını uyarır. LH'nin etkisi altında (optimal FSH ve LH oranı yaklaşık 1:10 ile), yumurtlama ve korpus luteum oluşumu meydana gelir. Litotropik hormon, korpus luteumun işlevini düzenler, onu progesteron üretimine uyandırır, emzirme döneminde meme bezinin işlevini uyarır. Korpus luteum hormonu, LH'nin daha fazla salınmasını engeller, hipofiz bezinin luteotropik fonksiyonunu uyarır, FSH'nin salgılanmasına müdahale etmez, bu da yeni foliküllerin büyümesine neden olur ve cinsel döngü tekrarlanır.

Hamilelik meydana geldiğinde, uterusta östrus sırasında meydana gelen proliferatif süreçler korpus luteum hormonunun etkisi altında yoğunlaşır. Progesteron, endometriyumun salgılama fonksiyonunun gelişimini belirler, uterus mukozasını embriyonun bağlanması ve normal gelişimi için hazırlar, ilk aşamada gebeliğin korunmasına katkıda bulunur (korpus luteum eksikliği veya ekstrüzyonu ile, embriyo). ölür, kürtaj olur); foliküllerin büyümesini ve yumurtlamayı engeller, uterus kasılmasını önler (progesteronun antifoliküler işlevi), meme bezlerinde hipertrofiye neden olur ve onları emzirmeye hazırlar.

Cinsel fonksiyonun düzenlenmesinde, prolaktin, progesteron ve diğer hormonların sentezini uyaran, luteotropin salgılanmasını azaltan ve doğumun düzenlenmesine katılan uterus ve diğer organların mukoza zarı tarafından üretilen prostaglandinler yer alır; PG-F rahmin kasılmasını arttırır, korpus luteumun emilimini uyarır, kandaki progesteron içeriğini azaltır; PG-E uterus kontraktilitesini azaltır.

Donör (lat. (1po - daryu) - olağanüstü bir üreticinin spermiyle hormonal stimülasyon, süperovülasyon ve tohumlamadan sonra embriyoların elde edildiği, üreme değeri yüksek, anatomik ve fizyolojik olgunluğa ulaşmış bir dişi. alıcı (lat. dişli - alan, kabul eden), embriyoları taşımak için kullanılan daha az üretken bir hayvandır. Onlardan elde edilen buzağılara nakil denir.

Yüksek verimli hayvanların seçimi, nesilden nesile üretkenliklerinin artırılmasını sağlayan ana ıslah tekniğidir. Embriyo nakli yapılırken, daha az verimli alıcı hayvanlar tarafından beslenecek embriyo donörü olarak, üreme sürülerindeki dişi rekortmenlerin mümkün olduğunca kullanılması gerekmektedir. Verici inekleri seçmek için ana kriter süt üretimi seviyesidir, yani; yüksek genetik puanları ve arzu edilen özellikleri yavrulara aktarma yetenekleri. Bağışçıları seçerken, kökenleri, ebeveyn üretkenliği, süresi ekonomik kullanım, soyağacında seçkin ataların varlığı, üreme nitelikleri.

Birkaç laktasyonda donörlerin üretkenliği cins standardının %50-80 üzerinde olmalı ve sütteki yağ içeriği standarda eşit veya üzerinde olmalıdır. Fransız uzmanlara göre, verici ve alıcı arasındaki verimlilik farkı en az 200 kg süt olmalıdır. SSCB'de kabul edilen standartlara göre, süt verimi seviyesi 305 günlük laktasyonda en az 7000 kg süt olan ve yağ içeriği% 3,6-4,2 olan inekler donör olarak kullanılmaya uygundur. Gelecekteki boğaların donör annelerinin seçimi daha da dikkatli bir şekilde gerçekleştirilir. Donör inekleri seçerken süt üretimi ve yağ içeriği düzeyini değerlendirmenin yanı sıra bir dizi ek özellik kullanılır: meme ve meme başlarının şekli, süt akış hızı, sütteki protein içeriği, yapısı, kemiklerin ve toynakların gücü, kalıtsal direnç (mastitis ve diğer hastalıklara yatkınlık), birkaç buzağılama için üreme işlevinin göstergeleri, adaptif özellikler. Bir dizi üreme özelliğine göre (süt üretimi seviyesi, meme ve meme başlarının şekli, süt akış hızı, bünye), donör inekler elit kayıt sınıfının gereksinimlerini karşılamalı, hastalıklara dayanıklı, teknolojik streslere dayanıklı olmalıdır. ve üreme kapasitesi yüksektir. Genellikle sadece genç (4-5 yaşında) sağlıklı, yüksek verimli inekler veya metabolik bozuklukları olmayan, son üç yıl içinde en uygun doğum sonu ve ara doğum süresiyle en az iki normal doğum yapmış inekler dönemde donör olarak kullanılmaktadır. 8 yaş ve üzerindeki hayvanlar, gonadotropin enjeksiyonlarına süperovulatuar yanıtta bir azalma nedeniyle bu amaçlar için çok az kullanılır. İtlaf edilen inekler, ancak yüksek damızlık ve emtia değeriÖnceki yıllarda sağlık ve itlaf sebebinin üreme kabiliyetindeki azalma ile ilgili olmaması şartıyla. 15 aydan büyük düvelerin donör olarak kullanılma olasılığı, orijinli olmaları koşuluyla dışlanmaz (ancak, emziren olmayan hayvanların gonadotropik hormonlara laktasyondakilere göre daha kötü tepki verdiği akılda tutulmalıdır).

Donörlerin seçimi, her hayvan veya hayvan grubu için bir veteriner sertifikası düzenlenmesi ile komisyon bazında gerçekleştirilir. Donör ineklerin seçildiği çiftlikte bruselloz, tüberküloz, paratüberküloz enterit, lösemi, klamidya, kampilobakteriyoz, viral solunum yolu hastalıkları, enfeksiyöz rinotrakeit, püstüler vulvovajinit, şap ve diğer bulaşıcı hastalıklar bulunmamalıdır. Hayvanlar, anti-epizootik önlemler planına uygun olarak aşılanmalıdır. Her müstakbel donör kapsamlı bir klinik muayeneye tabi tutulur. Jinekolojik muayenede hayvanların genital organlarının durumu belirlenir. Donör sayısı, zor doğum yapmış, plasenta kalmış, mastitis, doğum sonrası hastalıklar, yumurtalık ve rahim disfonksiyonu, ayrıca jinekolojik hastalıklar, yetersiz beslenme, metabolik bozukluklar ve diğer patolojik süreçleri içermeyen hayvanları içermez. Seçilen ineklerde cinsel döngünün süresinin belirlenmesi gereklidir. Düşük cinsel döngüye sahip hayvanlar, anafrodizya donör sayısından hariç tutulur, diğer çiftliklerden alınan inekler önceden aşılanır.

Hormonal tedavi (süperovulasyonun uyarılması) doğumdan 2-3 ay sonra başlar. Hormon tedavisine yanıt vermeyen hayvanlar donör sayısından çıkarılır. Donörün süperovulatuar tedaviye verdiği yanıttaki önemli değişkenlik akılda tutulmalıdır: donör ineklerin %20-40'a kadarı canlı embriyo üretmez; yaklaşık / 3 donörün itlaf edilmesi gerekiyor. Transplantasyonu planlarken, bir tedavide her donör inekten ortalama beş tam teşekküllü embriyo elde etme olasılığından hareket ederler. Yıl içinde donör tedavi sayısı, tedaviye yanıt olarak ihtiyaçlara göre ayarlanır. N.I.'ye göre. Kirillova ve diğerleri (1986), hormonal tedavilere iyi yanıt veren ve birinci ve ikinci ekstraksiyon için en az beş normal embriyo veren inekler donör olarak tekrar tekrar kullanılmaya uygundur.

Bağışçıların kullanım sıklığı konusunda fikir birliği yoktur. Bir sonraki yıkamadan en geç 1,5-2 ay sonra tekrar kullanılabilirler. Kural olarak, embriyoların yıkanmasından yaklaşık 30 gün sonra, donör ineklerde cinsel döngünün uyarılma aşaması yeniden başlar. Amerika Birleşik Devletleri'nde, embriyolar yıkandıktan sonra iki östrus döngüsünü atlayarak donör inekleri yeniden hormonal olarak tedavi etmek gelenekseldir. Fransa'da embriyoların çıkarılmasından sonraki 7. günde donörler prostaglandin ile tedavi edilir, ardından bir veya iki döngü atlanır ve ardından bir sonraki döngünün 8-12. gününden başlayarak donörler tekrar tedavi edilir. SSCB'de, donör ineklerden embriyo elde etmek için 45-60 gün arayla iki veya üç kez kullanılması ve ardından doğal üreme için sürüye geri verilmesi önerildi. Bu süre zarfında, silaj ve konsantre arzını sınırlayarak tam teşekküllü beslenme sağlanır; günlük aktif egzersiz sağlar.

Donör olarak bir ineğin tek bir kullanımıyla, buzağılamadan döllenmeye kadar geçen sürenin 40 güne ve tekrarlanan kullanımla buna karşılık gelen daha fazla gün arttığına dikkat etmek uygundur (N.I. Kirillova ve diğerleri, 1986). İneklerin hormon tedavisi süt üretimini azaltabilir ve hatta durdurabilir. Süt verimini eski haline getirmek için donörlere enjeksiyon yapılabilir.

prostaglandin F-2 alfanın (estrofan, enzaprost, estrumat) sentetik analoglarının bölümleri.

Alıcı olarak, damızlık değeri düşük inekler (tercihen altı yaşından büyük olmayan) ve ortalama şişmanlıktaki (canlı ağırlık 340-380 kg; hibritlerden daha iyi) 16-20 aylık düveler kullanılır. Alıcı hayvanlar iyi gelişmiş, klinik olarak sağlıklı ve patolojik değişiklikler belirgin bir cinsel döngü ile genital bölgede ve metabolik bozukluklarda. Teşhis çalışmaları bruselloz, trikomoniyaz, taşlar, bakteriler, lösemi, rinotrakeit, leptospiroz, klamidya, paratüberküloz ve diğer bulaşıcı hastalıkları dışlamalıdır.

Bağışçı ve alıcılar için önerilen koşul 1:5-10'dur. Embriyo transplantasyonunun etkinliği büyük ölçüde verici ve alıcılardaki cinsel döngünün senkronizasyonuna bağlıdır. Bu nedenle, östrus fazının tezahür zamanını, cinsel döngünün süresini doğru bir şekilde belirlemek gerekir.

Hayvanların normal üreme yeteneği ve iyi gelişmiş bir yavru üretimi, büyük ölçüde, fizyolojik durumları ve verimlilikleri dikkate alınarak, donörlerin ve alıcıların tam teşekküllü dengeli beslenmesi ile sağlanır. Beslenme standartlarına göre hayvanların beslenmesi, optimal oranlarında enerji, protein, karbonhidratlar, makro ve mikro elementler, vitaminler açısından dengelenmelidir. Bağışçılar ve alıcılar, çeşitli yüksek kaliteli yemleri doğru bir şekilde seçerek, bireysel rasyonlara göre beslenir. Kuru ineklerin beslenmesine özel dikkat gösterilmelidir: Diyetleri kaliteli saman ve minimum miktarda sulu, yeşil ve konsantre yemden oluşmalıdır.

Süper yumurtlamayı tetikleme yöntemleri. Donörlerde çoklu yumurtlama, cinsel süreçlerinin nörohumoral düzenlemesinin özellikleri dikkate alınarak hormonal tedavilerinden kaynaklanır. Özellikle donörlerde süperovulasyonun uyarılması, kanlarındaki FGS içeriğindeki artışa, buna bağlı olarak birçok folikül olgunlaşmasının uyarılmasına dayanır; korpus luteumun uygun gerileme anında indüksiyon ve maksimum sayıda olgun follikülün ovulasyonu. Bu amaçla, doğal hamile kısrak serumu (FFA), keofilize hamile kısrak serumu, safra proteinlerinden arındırılmış (PMSF) veya hayvanat bahçesi kullanılır.

hayvanların hipofiz bezinden elde edilen folikül uyarıcı hormon (FSH), luteolitik hormon (prostaglandin F-2 alfa-estrofan, ekzoprost, estrafulan, vs.'nin sentetik bir analoğu) ile kombinasyon halinde.

FFA ve GSFA, biyolojik özelliklerinde ön hipofiz bezinin gonadotropik hormonları olan gonadotropik hormonları içeren müstahzarlardır. Serum gonadotronin, folikül uyarıcı ve luteinize edici etkiye sahiptir, ilki ikincisinden 2-3 kat daha güçlüdür. FFA aktivitesi (FSFA), uluslararası veya fare (IU) birimlerinde ölçülür. Bir uluslararası birim (veya 2,5 IU), 0,25 mg standart bir ilaca eşittir. İçindeki gonadotropinlerin içeriği ile belirlenen hormonal serum titresi, 1 ml'de 60 ila 300 IU arasında değişir ve genellikle 1 ml doğal serumda 120-180 IU'dur.

PMFA donör inekler, yumurtalıklardan birinde iyi gelişmiş bir korpus luteum varlığında cinsel döngünün ortasında bir kez deri altından enjekte edilir. Süper yumurtlama dozu 200-300 IU'dur (dozdaki bir artış, yumurtlanmış foliküllerin sayısında bir artışa yol açar, ancak buna, yumurtalıklarda kist oluşumu ile dolu, döllenmemiş ve dejenere yumurtaların sayısında bir artış eşlik eder) . 40-48 saat sonra - estrofan veya estrumat - 500 mcg. Aynı zamanda donör başına 6-7 ovulasyon elde edilmektedir. Ekzoprost - 30 mg girebilirsiniz. Çoğu hayvanda, prostaglandin enjeksiyonundan 48 saat sonra ısı ortaya çıkar.

Bununla birlikte, ineklerin %40-70'inin süperovulasyon yoluyla PMSG verilmesine tepki verdiğine dikkat edilmelidir. Geri kalanı atipik reaksiyonlara sahiptir: folikül büyümesinin olmaması, az sayıda yumurtlanmış folikül, foliküler kistlerin oluşumu. Bununla birlikte, böyle bir tedaviden sonra doğurganlıkta bir azalma, zigot gelişimindeki bozukluklar not edilir. Bu olumsuz sonuçlar, hormonal dengesizlik ile açıklanmaktadır, çünkü eksojen FFA gonadotropinleri dişilerin vücudundaki biyolojik aktiviteyi iki hafta boyunca muhafaza etmektedir.

FFA gonadotropinlerinin yumurtalıklar üzerindeki uzun vadeli etkisini ortadan kaldırmak için, gonadotropinler için antiserum kullanılması önerildi: donör, MFFA enjeksiyonundan dört gün sonra antiserum ile tedavi edildi. Aynı zamanda, N.I.'ye göre. Sergeeva (1986), süperovülasyon 9.2 ile reaksiyona girer; normal embriyoların verimi 1,8'den 4,1'e çıkar. Ancak bu tür sonuçlar PMSG ile yapılan ilk iki tedaviden sonra elde edilir; üçüncü tedaviye yanıt veren hayvan sayısı %50 oranında azaltılır, transplantasyona uygun embriyo verimi reaksiyona giren donör başına 2,8'e düşürülür. Çekoslovak veya Belçika üretimi bir antiserum ile kombinasyon halinde standart bir FFA (folligon) hazırlığı ile daha kararlı sonuçlar elde edilir: donörlerin yaklaşık% 90'ı süperovülasyon ile reaksiyona girer, her biri ortalama 7.4 yumurtlama alır.

Folikül uyarıcı hormonu (FSH-P) cinsel döngünün 9. gününden 12. gününe kadar kullanmak daha etkilidir. Bu ilacın avantajı, çoklu (5-8 kez) tedavi ile yumurtlama ve normal embriyo sayısının azalmaması ve hatta bazı durumlarda artmasıdır. Vücuttaki hızlı inaktivasyon nedeniyle, FSH-P fraksiyonel dozlarda uygulanır (tedavi süresince ilacın tüketimi 32-50 mikrondur). FSH-P'nin kullanımı için çeşitli seçenekler önerilmiştir. Yani, V.P. Belyaev ve diğerleri (1988), FSH-P'yi 12 saatlik aralıklarla azalan dozlarda kullandıklarında iyi bir süperovulasyon yanıtı elde ettiler: 8 + 8 + 8 + 5 + 3 + 3 + 2 + 2 mg; Tedavinin başlamasından 48 saat sonra, donör bir ineğe 2 mg (500 μg) dozunda estrofan enjekte edilirken, ineklerin %71'inden fazlası poliovülasyonla yanıt verdi ve ortalama 8,7 yumurtlama sayısı elde edildi (donör başına 6,5 ​​embriyo alındı) 4.8'i tam teşekküllü idi). Estrofan en iyi 12 saat arayla iki kez uygulanır: ilk kez - 500 mcg, ikinci - 250 mcg.

Hayvanların yaklaşık %30'unun FSH'ye yanıt vermediği akılda tutulmalıdır.

Donör ineklerin tedavisi, organizmanın hormonal ilaçlara karşı bireysel reaktivitesi dikkate alınarak gerçekleştirilirse, hayvanların süperovulatuar tepkisi arttırılabilir (V.V. Madisson, S.N. Krylov, 1986). Donör ineklerde embriyonik üretkenlik ile süt üretkenliği arasında pozitif bir ilişki ortaya çıktı: Süt verimliliği daha yüksek olan ineklerden daha az verimli hayvanlara göre daha fazla embriyo elde edildi.

İlacın tipine, kalitesine, dozuna, süresine, kullanım sıklığına, hayvan tedavi yöntemine, folikülojenez seviyesi gibi genetik olarak belirlenmiş faktörlere bağlı olarak önemli bir süperovülasyon değişkenliği (1 ila 100 folikül) kurulmuştur. Hormonal tedaviye cevap verebilecek primer foliküllerin sayısı, organizmanın immün reaktivitesi, ayrıca hayvanın cinsi, yaşı, laktasyon durumu, sağlık durumu, yumurtalıkların büyüklüğü ve gonadotropine duyarlılığı, beslenme koşulları ve donörler ( Yablonsky VA, 1988).

Verici inekleri işlemek için çeşitli planlar vardır.

Şema 1. Cinsel döngünün 10-12. Günü - doğal PMSG preparasyonu - 3000-3800 IU, PUFA ile karışım halinde hormon - 500 IU; 12-14 gün - prostaglandin - 500-30 mcg/mg; 14-16. günler - avlanma, tohumlama; 21-23 gün - embriyonun çıkarılması.

şema 2. Cinsel döngünün 2. günü - vitamin ANCAK- 150.000 IU vitamini E- 100 mg, sulu potasyum - 100-200 mg; 10-12. gün - on-

aktif ilaç PMSG - 3000-3800 IU, vitamin ANCAK- 7500 IU, U vitamini - 50 mg; 12-14 gün - prostaglandin - 500-30 mcg/mg; 14-16. günler - avlanma, tohumlama; 21-23 gün - embriyoların çıkarılması.

Şema 3. Cinsel döngünün 8., 9., 10., 11., 12. günleri - FSH-P - 10 mg; 13. gün - avlanma, tohumlama; 20. gün - embriyoların çıkarılması.

Cinsel döngünün 16-17. gününde süperovulasyonu indükleme adı verilen yöntemle, ineğe 1500-3000 IU PMSG enjekte edilir. Zaten 2. günde hayvanlarda avlanma görülür. Tanımlamayı kolaylaştırmak için 10. ve 20. günlerde 10 mg ekstradiol benzoat ve 21. günde - avlanma gününde - damardan 1500-300 IU koryonik gonadotropin enjekte edilir.

Daha önce de belirtildiği gibi, şu anda gonadotropinlerle tedavi, döngünün luteal fazında gerçekleştirilmektedir. Aynı zamanda donörlere önce prostaglandin verilir (11 gün arayla bir veya daha iyisi iki kez), ısının başlama zamanı belirlenir (bu günü “sıfır” olarak alacağız) ve bundan sonraki 8-13. gün, yani aktif luteal faza 1500-3000 IU PMSG enjekte edilir. Luteolistik bir etkiye ve yumurtlamaya neden olan prostaglandini (veya analogunu) kullanmanın "Danimarka" yöntemi bu prensibe dayanmaktadır.

Embriyo verimini ve biyolojik yararlılığını artırmak için donör ineklere vitamin preparatları da verilir. (ANCAK - 120-150 bin IU, - 80-100 mg), eser elementler (potasyum iyodür - günde 100-200 mg yemekle birlikte).

Fransız donör hazırlama programı, senkromat B (bileşiminde bir progesteron ve estradiol analoğu içeren yeni bir prostaglandin) yardımıyla avlanmalarının ön senkronizasyonunu sağlar. İlaç, donöre kulak derisinin altına implante edilir. 9. günde implant çıkarılır. 11. gün hayvan avlanmaya başlar. 10-22. gün donörler tohumlanır ve 33. gün embriyolar alınır.

Donörler için belirgin bir av, yumurtalıklarının hormonal preparatlara iyi tepki verdiğini gösterir. Tohumlama sırasında yaklaşık sayıda olgun folikül oluşturmak zordur. Oluşan korpus luteum sayısı ve elde edilen embriyo ve yumurta sayısı açısından bunu yumurtlamadan sonra yapmak daha iyidir.

İnekler hormon tedavisine yanıt vermezlerse donör sayısından çıkarılırlar.

Donör koyunlarda süperovulasyonu indüklemek için cinsel siklusun 12-13. gününde serum gonadotropin 700-1500 IU enjekte edilir. Avlanma 2-4 günde gerçekleşir, tedavi edilen koyunların %74-100'ünde süperyumurtlama görülür. Erken östrusta intravenöz olarak uygulanabilir.

500-100 IE hCG (koryonik gonadotropin) (Vlakhov K.N., 1982). Cinsel döngünün 11. gününde 12.000 IU FFA ve 68 saat sonra 260 μg prostaglandin verilmesi ile iyi sonuçlar alınır. Bu durumda 3 ila 38 yumurtlama meydana gelir (Averill R.L., 1958; Sergeev N.I. ve diğerleri, 1984).

Domuzlarda 600-800 dozda PMSG kullanımı ile süperovulasyon meydana gelirken, yumurtlama sayısı 33-38'e ulaşmaktadır. Kısraklarda çocuk felcini uyarmak için 2000-3000 IU hCG enjekte edilir.

Kadın donörlerin tohumlanması. Kadın donörler cinsel uyarılma aşamasında (yumurtlamanın başlamasından önceki östrus aşamasında) hormon tedavisi gördükten sonra tohumlama işlemine tabi tutulurlar. Şu anda, bir çiftlik hayvanı sürüsünün çoğaltılması, suni tohumlama yönteminin yaygın kullanımına dayanmaktadır.

Folikülin aşamasında (cinsel döngünün 15-16. gününde) gonadotropinlerle tedavi edilen ineklerde, avlanma 3-7 gün sonra gerçekleşir. Cinsel döngünün luteal fazında gonadotropinler ve prostaglandin F-2 alfa ile kombine tedaviye tabi tutulan ineklerde avlanma, prostaglandin enjeksiyonundan 36-75 saat sonra gerçekleşir ve ortalama 24 saat (36-48 saate kadar) sürer. Bunu tespit etmek için her 3-4 saatte bir avlanma testi yapılır Prostaglandin uygulamasından 54-60 saat sonra yumurtlama başlar; iki güne kadar uzar. Kızgınlığın keşfinden 8-12 saat sonra (Newcomb, 1980 - prostaglandinlerin kullanımından en geç 48 saat sonra), tekrar - 12 saat sonra inekleri suni olarak tohumlamak gerekir; uzun süreli bir avda, aynı süreden sonra üçüncü (ve muhtemelen dördüncü) tohumlama gerçekleştirilir. Kızgınlığın başlangıcı belirlenemezse donör inek, prostaglandin enjeksiyonundan 56 ve 72 saat sonra sabit bir zamanda tohumlanır.

Verici ineklerin suni tohumlanması için, yavruların kalitesiyle değerlendirilen ve iyileştirici olarak kabul edilen yüksek kaliteli baba spermleri kullanılır. Serviksin rektal fiksasyonu ile servikal suni tohumlama yöntemini uygulayın; Enjekte edilen sperm dozunda en az 40-50 milyon aktif sperm bulunmalıdır.

Koyunların suni tohumlanması şu şekilde yapılır: Ağustos-Eylül aylarında - kış kuzulaması elde etmek için ve Ekim-Kasım aylarında - tüm işlerin 35-40 gün içinde tamamlanmasıyla ilkbahar kuzulaması elde etmek için. Avcılıkta ana arı seçimi, sonda koçları yardımıyla sabahın erken saatlerinde başlar. Koyunlar av döneminde iki kez tohumlanır: sabah - içlerinde avlanma olgusunun oluşmasından kısa bir süre sonra, tekrar - aynı günün akşamı veya (avlanmaya devam edilerek) ertesi sabah. Suni tohumlama, vajinal spekulum ve cam şırınga-kateter veya yarı otomatik şırınga kullanılarak visoservikal yöntemle gerçekleştirilir. Dozunda en az 50 milyon aktif sperm içeren (taze elde edilen spermin sperm aktivitesi en az 8 olmalıdır) 0,06 (yeni elde edilmiş) ila 0,1-0,2 ml (seyreltilmiş) meni arasında 1-2 cm derinliğe kadar servikal kanala girin. kısa bir süre için saklanan puanlar - 7 puandan az değil).

Domuzların suni tohumlanması aşağıdaki terimlerle gerçekleştirilir:

• 1) kızgınlık evresindeki dişi domuzlarda gün boyunca üç tespit ile - bir kez, ortalama olarak, kızgınlığın başlamasından 24 saat sonra;
• 2) dişi domuzda gün içinde iki kez kızgınlık tespit edilmesi durumunda - ilk kez - kızgınlık belirtileri belirlendikten 12 saat sonra, tekrar - 12 saat sonra; 3) Kızgınlık evresinde (sabah) gün boyunca dişi domuzların tek bir tespiti ile - oluşumundan hemen sonra ve tekrar 24 saat sonra.

İki intrauterin suni tohumlama yöntemi kullanılır: 1) POS-5 cihazı kullanılarak VIZH teknolojisine göre seyreltilmiş sperm ile tohumlama (sperm, 1 kg hayvan ağırlığı başına 1 ml hacimde, ancak 150 ml'den fazla olmamak üzere enjekte edilir, 3-5 milyar aktif sperm içerir); 2) UZK-5 evrensel probu kullanılarak fraksiyonel tohumlama yöntemi (2-3 milyar aktif sperm içeren 40-50 ml seyreltilmemiş veya hafif seyreltilmiş sperm enjekte edilir ve ardından 70-80 ila 100 ml tuzlu su çözeltisi enjekte edilir). Tohumlama için, aktiviteye sahip sperm kullanılır: taze elde edilmiş - en az 7 puanlık bir aktiviteye sahip, kısa süreli saklanmış - en az 6 puanlık bir aktiviteye sahip.

Kısraklarda suni tohumlama, olgunluğun 3. ve 4. aşamalarında bir folikül varsa (3. ve 4. aşamada avlanma belirtilerinin açık bir şekilde gösterilmesiyle) yapılır ve yumurtlama ve avlanma belirtileri oluşana kadar her 24 saatte bir tekrarlanır. solmak. Kısraklar, 30-40 ml kapasiteli bir cam şırınga ile kauçuk veya ebonit bir sonda kullanılarak intrauterin olarak tohumlanır. Bir semen dozu (25 ila 45 ml) en az 300 milyon aktif spermatozoa içermelidir. Sperm aktivitesi: taze elde edilen ejakülatlarda - en az 6 puanlık bir aktivite, dondurulmuş ve çözülmüş spermde - en az 2 puanlık bir aktivite olmalıdır.

Embriyoların çıkarılması. Süperovulasyon sırasında foliküller aynı anda açılmadığı için yumurtaların döllenmesi ve yumurta kanalından geçişleri zamanla gerilir. 4-5. Günde, ana embriyo sayısı yumurta kanalından rahim boynuzuna hareket eder, ancak bunların yaklaşık% 10'u yumurta kanalında 8 güne kadar kalabilir. Yavaş yavaş, embriyolar uterus boynuzunun tepesinden ön kısmına kayar ve 7-8. Günde sayılarının yaklaşık% 73'ü burada, yaklaşık% 20'si ortada tutulur.

boynuzun parçaları ve% 7 - yumurta kanallarında. 8-9 güne kadar embriyolar serbest durumda kalır.

Verici ineklerde tohumlamadan sonraki altıncı-yedinci günde rektumdan dikkatli palpasyonla korpus luteum sayısı sayılır ve gelişim dereceleri belirlenir. Bundan sonra embriyolar çıkarılır. Donör hayvanlardan embriyo alımı iki yöntemle gerçekleştirilebilir: cerrahi ve cerrahi olmayan.

1970'lerin ortalarına kadar. ineklerden alınan embriyolar, operasyonun gerçekleştirildiği aşamaya bağlı olarak, esas olarak cerrahi yöntemle, yumurta kanalından veya rahim boynuzundan çıkarıldı. Cerrahi yöntem kullanılırken donör 1-1,5 gün açlık diyetinde tutulur ve operasyondan 6 saat önce sulama yapılmaz.

Birkaç operasyonel yaklaşım önerilmiştir: karnın beyaz çizgisi boyunca, aç fossa bölgesinde (sol veya sağ), vajinanın üst tabakası boyunca.

Beyaz çizgi boyunca laparotomi ile embriyoların cerrahi olarak çıkarılması, daha çok düvelerde, iyi donanımlı bir klinikte gerçekleştirilir.

Premedikasyon, kas içine 2 ml rampun, 4 ml %0.1 atropin çözeltisi veya 4 ml combelin enjeksiyonunu içerir. Hayvan sırtüstü pozisyonda ameliyat masasına sabitlenir. Operasyon genel anestezi altında gerçekleştirilir (100 kg hayvan ağırlığı başına 100 ml oranında intravenöz% 10 kloral hidrat çözeltisi). Anestezi ve cerrahi alan hazırlığından sonra beyaz çizgi boyunca pelvise mümkün olduğunca yakın (meme bezinin önünden) 15 ila 30 cm uzunluğunda bir karın kesisi yapılır. Peritonda bir kesi yaptıktan sonra, karın boşluğuna bir el sokulur, uterusun bir boynuzu bulunur ve sarı cisimlerin sayısının sayıldığı yumurta kanalı ve yumurtalık ile birlikte çıkarılır. Vücut yara deliğine sabitlenir. Embriyoyu çıkarmak için rahim bol miktarda sıvı ile yıkanır. Embriyo yıkama uterus veya utero-oviduct yöntemiyle gerçekleştirilebilir. Her iki durumda da, önce vücuduna yakın uterus boynuzunun duvarında küçük bir kesi yapılır, içinden bir Folly kateteri sokulur ve boynuzun tepesine ilerletilir. Kateterin balon manşetine 20-30 cm hava enjekte edilir.

Rahim yöntemini kullanırken, rahim boynuzunun üst kısmı bir iğne ile delinir, içinden bir şırınga ile 37 ° C'ye ısıtılmış bir yıkama sıvısı enjekte edilir - % 1 sığır albümini veya steril serum ilavesiyle Dulbecco ortamı (kısımlar) boynuzun lümenine 120 ml'ye kadar sıvı enjekte edilir). Folly kateterinden dışarı akan yıkama sıvısı, 150 ml kapasiteli steril bir şişede (test tüpü) toplanır. Aynısını diğer rahim boynuzu için de yapın.

Uterus tubal yöntemi, embriyoları yıkamak için, elastik hortumlu (kauçuk veya cam kanül) künt bir iğnenin, huninin yanından ampulla yumurta kanalına sokulması ve içinden geçen bir yıkama sıvısının beslenmesi bakımından farklılık gösterir. yumurta kanalı, uterus boynuzu ve Folly kateteri (Şekil 12.6) yoluyla steril bir damara girer.

Pirinç. 12.6.

Aç fossada laparotomi ile embriyoların cerrahi olarak çıkarılması en basit ve en az zaman alan yöntemdir. Lokal anestezi altında yapılabilir.

Donör inek ayakta sabitlenir ve ameliyat sahası genel kabul görmüş cerrahi prensiplere göre hazırlanır. Premedikasyon, rampanın 0.7 ml'sinin kas içine enjeksiyonu ile gerçekleştirilir. Abdominal insizyon hattı boyunca infiltrasyon anestezisi ile birlikte %2'lik bir novokain solüsyonu (I.I. Magda'ya göre) ile paralumbar anestezi uygulayın. İkincisi, kalça eklemi seviyesinde başlar ve ondan 2 cm ileri geri adım atar (çizginin önünde 8 cm mesafede). diz eklemi dış iliak tüberkül ile kaburganın arka kenarı arasında, bel omurunun enine kostal işlemlerinin 10 cm altında). Embriyo yıkama, yukarıda tarif edilenle aynı şekilde gerçekleştirilir.

Yıkandıktan sonra rahim yerine getirilir, karın boşluğu serum fizyolojik ile yıkanır, içine 1 milyon ünite penisilin ve streptomisin enjekte edilir, karın duvarındaki yara trisilin tozu ile toz haline getirilip dikilir ve ardından iyot solüsyonu ve yapışkan bandaj uygulanması. Dikişler iki hafta sonra alınır.

Rahim ağzı yapısının anatomik özelliklerinden dolayı embriyoların ameliyatsız çıkarılmasının mümkün olmadığı durumlarda, üst vajinal fornikste bir kesi yoluyla embriyoların çıkarılması cerrahi yöntemi (transvajinal yöntem) kullanılır. Bu yöntem sadece donörün tek kullanımı için uygundur.

Hayvan makineye sabitlenir ve her ovaryumdaki korpus luteum sayısı sayılır. Perine bölgesi sabunlu su ile yıkanır, %70 alkol ile dezenfekte edilir. Premedikasyon, son sakral ve birinci kaudal omurlar arasına 0.7 ml rampoon, 4 ml combelene veya 4 ml %0.1 atropin kas içi enjeksiyonu ve 5-10 ml %2'lik novokain solüsyonunun epidural enjeksiyonu ile gerçekleştirilir. 10-15 dakika sonra kuyruk yana alınır, bandajla sabitlenir; Vajinanın iç yüzeyi %2'lik diosit solüsyonu ile irrige edilir. Elinizi sabun ve fırça ile iyice yıkayın, amonyak solüsyonu ile işlemden geçirin ve %5 iyot solüsyonu ile silin. Ellerine bir neşter alıp, koni şeklinde katlanmış parmaklarının arasına sıkıştırıp vajinaya sokarlar. Boynun bir tarafında vajinal fornikse 2-3 cm uzunluğunda dorsal bir kesi yapılır Vajinadan bir neşter çıkarılır, kesiden önce iki parmak karın boşluğuna sokulur, sonra geri kalanı ve tüm kol dönüşümlü olarak . Özel olarak hazırlanmış 1 - 2 mm çapında künt bir iğne, sarı cisimlerin bulunduğu yumurtalığa bağlı olan rahim boynuzunun çatallanma yerinin yakınından delinir. Oluşturulan delikten, embriyoların yıkanması için kateterin ucu balonla birlikte sokulur. Kanistere 7-10 cm3 hava enjekte edilir, 37°C sıcaklıktaki yıkama sıvısı bir şırınga ile rahim boynuzuna boşaltılır ve geri emilir. Yıkama süresi - 25-30 dakika; bu durumda embriyoların yaklaşık %70'ini toplamak mümkündür.

Transvajinal embriyo alımı için, bir lateks Folly katetere bağlı iki yan deliği olan metal bir kanülden oluşan özel bir alet de kullanılabilir. giymek orta parmak alet halkasını çıkarın ve elinizi vajinal insizyondan karın boşluğuna sokun. Uterus boynuzunun alt üçte birine ulaşırlar, lümenine bir kanül sokarlar ve yıkanırlar. Yıkama sırasında parmak halkadan çıkarılır, boynuzun tepesi kaldırılır ve parmaklarla rahim-tubal bileşke sıkıştırılır. Ameliyattan yaklaşık 4 gün sonra vajinal duvardaki yara iyileşir.

Hayvan makineye sabitlenmiştir. Vajinanın forniksinde uzunlamasına bir kesi yapılır ve kastrasyon şırıngaları veya efemenator dikkatlice içinden geçirilir. Yumurta kanalı, mezenter ve yumurtalık ile birlikte çıkarılacak olan rahim boynuzu elle tutularak açık cihaza konur. Alınacak genital bölgenin doğru yerleşimini kontrol ettikten sonra elin hafif baskısı ile efeminatörü kapatın ve somunun kanat kısmını hızlıca vidalayın, kesilen yeri ayırın ve karın boşluğundan çıkarın. Uterus kornasını hemostatik cımbızla klempleyin. Benzer şekilde rahmin ikinci boynuzunu da çıkarın. Efemenator 5 dakika kapalı bırakılır, ardından kesilen dokularla birlikte çıkarılır. Vajinal kesiden karın boşluğuna bir antibiyotik karışımı enjekte edilir.

Kesilmiş dokular laboratuvara aktarılır, incelenir, korpus luteum ve yumurtlamamış foliküllerin sayısı sayılır, yumurta kanalının yanından rahim boynuzunun açık ucuna doğru yıkanır, yıkama sıvısı steril Petri kaplarında toplanır. Bir boynuzu yıkamak için 20-60 ml, yumurta kanalı - yaklaşık 10 ml ortam harcanır.

Kesilen hayvanların üreme organlarından embriyo elde edilmesi en basit yöntemdir. Mezbahada (et işleme tesisi) kesilen hayvanlardan genital organlar çıkarılır, laboratuvara teslim edilir ve burada tohumlamadan sonra geçen süreye bağlı olarak rahim boynuzları veya yumurta kanalı yukarıda açıklanan yöntemle yıkanır. Kesilen birçok hayvandan embriyoların yıkanması, kesimden sonra 2-2,5 saatten fazla geçmemişse etkilidir.

Cerrahi yöntemler karmaşıktır, zaman alıcıdır, bir hayvan için en fazla üç kez kullanılabilirler.

Embriyoların cerrahi olmayan ekstraksiyonu, pratik koşullar (hayvan çiftliklerinde) için en kabul edilebilir yöntemdir.

Donör embriyolarını yıkamadan önce, 12 saat açlık diyetine devam edilmesi arzu edilir. Hayvan makineye sabitlenir, düşük epidural anestezi yapılır, rektum dışkıdan arındırılır. Her yumurtalıkta korpus luteum sayısını belirleyin. Kuyruk bandajlanır, hayvanın boynuna bağlanır. Dış genital organların bulunduğu bölge ve perine ılık su ve sabunla yıkanır, peçete ile kurutulur ve %70'lik etil alkol veya Septonex aerosol ile dezenfekte edilir. Embriyonun cerrahi olmayan ekstraksiyonu için en uygun zaman, uterus boynuzunun ön ve orta kısmında yer aldığı ve utero-yumurta kanalının sıkıca kapatıldığı tohumlamadan sonraki yedinci-sekizinci gündür.

Rektumda bulunan polietilen eldivenli bir elin kontrolü altında, metal bir stile yerleştirilmiş iki yönlü bir ürolojik Folly kateter servikal kanala sokulur. Uterus boynuzlarından birine yönlendirilir, balon kaf çatallanmanın arkasına gelene kadar ilerler ve kateterin ucu boynuzun tepesine ulaşır. Stile çıkarılır. Kateteri sabitlemek ve lavaj boşluğunu sınırlandırmak için balon manşete 15-20 cm3 hava enjekte edilir. Daha sonra katetere bir şırınga takılır, musluk açılır ve orta basınç altında uterus boynuzuna 20-60 ml fizyolojik sıvı enjekte edilir (% 1 fetal serum veya sığır serum albümini ilavesiyle Dulbecco'nun fosfat tamponu) (4 mg / ml) veya orta TCM-199 ve ayrıca 100 IU penisilin içinde 0.06 mg / ml dihidrostreptomisin sülfat), 37.3-38 ° C sıcaklığa sahip. Rahim boynuzu, embriyoları duvarlarından ayırmak için hafifçe masaj yapılır. Musluk değiştirilir, yıkama sıvısı steril bir kaba dökülür. Toplu yıkama 4-7 kez tekrarlanır, fizyolojik ortamın boynuz başına toplam tüketimi 200-500 ml'dir. Yıkanırken uterustan elde edilen solüsyonun hacmi dikkate alınır çünkü azalmasıyla yıkanan embriyo sayısı azalır. Embriyoların çoğu ilk üç yıkamada bulunur. İşlem tamamlandıktan sonra kateter diğer boynuza aktarılır ve buradan embriyolar aynı şekilde çıkarılır.

Fransız şirketi IMB, kanüllü esnek teleskopik problu üç kanallı bir kateter önerdi. Prob, bir hava buharı-formalin odasında (paslanmaz çelik veya buhar formu tabletli plastik kasa) monte edilmeden saklanır ve taşınır. İşlemden sonra prob ve esnek tüpler distile su ile yıkanır, esnek bağlantı tüplerinden hava üflenerek kurutulur.

V.P. Belevich (1986), donörlerden embriyoların yaklaşık %75'inin çıkarılmasına izin veren kelepçesiz tek kanallı bir kateter tasarladı. F.I. Ostashko, diğer bilim adamlarıyla birlikte, embriyoların aseptik olarak elde edilmesi, aranması, değerlendirilmesi ve saklanması için bir cihaz önerdi. Kapalı bir hidrostatik sistem ve dört yollu bir valf kullanılarak ineklerden embriyoların yıkanması için geliştirilmiş bir yöntem I. Kh. Khabibulin (1986) tarafından anlatılmıştır.

Embriyoların yıkanmasının sona ermesinden sonra, uterus boşluğuna bir antibiyotik solüsyonu enjekte edilir. 4-5 gün sonra, cinsel döngünün bir sonraki uyarılma aşamasını önlemek için donör ineğe prostaglandin F-2 alfa enjekte edilir. Cerrahi olmayan bir yöntem kullanıldığında, embriyoların %42-50'si alınır (donör başına beşten fazla tam teşekküllü embriyo).

Koyunlarda embriyolar sadece cerrahi olarak genel anestezi altında veya karın beyaz çizgisi boyunca laparotomi ile lokal anestezi ile çıkarılır. Kullanılan yönteme bağlı olarak, embriyolar yumurta kanalından (3 güne kadar) veya rahim boynuzundan (3 ila 6 gün arasında) yıkanır. L. Rawson'a (1971) göre, hemen hemen tüm embriyolar yumurta kanalından ve% 90'a kadar rahim boynuzlarından yıkanarak çıkarılabilir.

Koyunlardaki embriyolar donörün kesiminden sonra laparotomi, histerektomi ile cerrahi olarak yıkanır. Bu durumda çan şeklinde bir kanül, plastik veya cam bir kateter kullanılarak yıkama sıvısının yumurta kanalından, utero-tubal bileşkeden, uterin boynuzun apeksinden verilmesi ve servikse doğru akması sağlanır. Embriyolar yıkanır ve bölünmemiş zigot aşamasından blastokist aşamasına, yani Tohumlamadan 1-5 gün sonra.

Donör kısraklardan alınan embriyolar hem cerrahi hem de cerrahi olmayan yöntemlerle yıkanır. Embriyoların cerrahi olarak alınması beyaz çizgi boyunca laparotomi ile gerçekleştirilir. İpsilateral uterus boynuzuna bir ligatür uygulanır ve bir kateter yerleştirilir. Bir şırınga kullanılarak 30-50 ml medyum yumurta kanalına enjekte edilir, bu da tohumlamadan sonraki 1-6. Günde embriyoların %77'sinin yıkanmasını mümkün kılar. Ayrıca sığır yetiştiriciliğinde kullanılan yöntemlerle ameliyatsız bir şekilde yumurtlamadan sonraki 7-8. günde embriyo elde etmek mümkündür. Uzatılmış bir Folly kateterin kullanıldığına dair raporlar vardır (Imel K. ve diğerleri, 1981) ve rahim, Krabs-Ringer, Praker, Tsyulbekko ve diğerlerinin bir solüsyonu ile yıkanır.

Embriyo teknolojisi.Önce embriyoları ararlar ve kalitelerini değerlendirirler. Cam silindirde toplanan embriyolu yıkama sıvısı alüminyum folyo ile kapatılır, steril bir kutuya aktarılır ve burada 37°C'de 30 dakika termostatta bekletilir. Yıkama sıvısını musluklarla donatılmış konik kaplara, ayırma hunilerine veya embriyolar için özel eleklere sahip kaplara yerleştirmek daha iyidir. Kutudaki sıcaklık 25-28°C olmalıdır. Burada günlük olarak embriyolarla çalışmadan 1-2 saat önce ıslak temizlik yapılır, aletlerin, ekipmanların, duvarların yüzeyi %70'lik alkolle silinir; antiseptik lambaları içerir. Personelin steril önlük, bone ve ayakkabı değiştirme ile çalışması, temiz, steril tabak ve aletler kullanması gerekmektedir. Çalışmadan önce eller% 70 alkolle nemlendirilmiş bir bezle tedavi edilir. Yıkama sıvısının ve embriyoların kirlenmesini önlemek için, Fransız teknolojisine göre, embriyolarla yapılan tüm manipülasyonlar, alçalan hava akışlarının mikrofloranın nüfuz etmesini önlediği özel dolaplarda laminer filtrelenmiş hava akışı altında gerçekleştirilir.

Embriyolarla çalışırken önceden hazırlanmış çeşitli ortamlar kullanılır (çözeltilerin ozmotik basıncı 300 min, pH 7.2-7.6 olmalıdır). Bunlardan en yaygın olanı Dulbecco'nun fosfat tamponlu besiyeridir, kullanımdan hemen önce 4 g sığır albümini eklenir (56 ° C'de 20 dakika inaktive edilmiş sığır veya koyun serumu ile değiştirilebilir, bu da ilave edilir) hacim ortamının %20'si oranında), 1,0 g glikoz, 0,036 g sodyum piruvat ve 100 bin ünite benzilpenisilin potasyum tuzu. Aynı besiyeri, embriyoların kısa süreli saklanması için kullanılır.

Yıkama sıvısı sifon yardımıyla çökeltildikten sonra üst tabakası emilir. Alt katman - tortu (50-100 mi), küçük porsiyonlar halinde (her biri 20-30 mi) 100 mm çapında Petri kaplarına veya tabanı 1 x 1 cm'lik yuvarlak tabanlı kaplara dikkatlice dökülür. kolaylık sağlamak için kareler ve 15-25x büyütmede binoküler büyüteç veya stereoskopik mikroskop (MBS-9) altında incelendi. Tespit edilen embriyolar bir mikropipet ile yakalanır ve besleyici ortam (Dulbecco solüsyonu veya embriyonik serum ilaveli TCM-199 ortamı) içeren 40 mm çapında bir Petri kabına yerleştirilir.

İnklüzyonların (atipik hücreler, mukus, kan pıhtıları) varlığı nedeniyle arama zor olabilir. Bu süreci kolaylaştırmak için, Ukrayna SSR'sine bağlı Orman-Bozkır Hayvancılık Araştırma Enstitüsü ve Polissya, embriyoları inceledikten ve çıkardıktan sonra, tortul sıvıyı bir homojenleştiricide 3-hızla döndürerek homojenleştirmeyi önerdi. 4-6 dakika 5 bin devir. Bu, yıkamaların optik yoğunluğunu önemli ölçüde azaltmayı ve ikinci bir arama sırasında embriyoların yaklaşık %20'sini saptamayı mümkün kılar.

Embriyoların aranması tamamlandıktan sonra, kaliteleri ters bir mikroskop kullanılarak değerlendirilir. Embriyoların incelenmesinde şunlar dikkate alınır: embriyonun gelişim aşamasının yaşına uygunluğu, embriyonun şekli, şeffaf zarın durumu (bütünlüğü), ezilme tekdüzeliği, sayısı ve blastomerlerin boyutu, sitoplazmanın durumu, perivitellin boşluğun şeffaflığı. Daha önce de belirtildiği gibi, gelişmekte olan bir embriyodaki blastomer sayısı yaklaşık olarak her 24 saatte bir ikiye katlanır.Örneğin, 2. günde 2 tane varsa, o zaman 3.-4. - 4-8, vb. 4-7. Günde morula aşamasına ulaşırlar, 7-8'de - erken blastosist, 8-9'da - blastosist, 9-10'da - geç blastosist, 10-11'de - embriyo şeffaftan çıkar. kabuk. Süperovulasyonun biraz uzaması ve yumurtaların eş zamanlı olmayan döllenmesi nedeniyle, yıkama sıvısında farklı yaşlarda embriyolar bulunabilir.

Biyolojik olarak tamamlanmış embriyolar (8 günlük), net bir küresel (doğru küresel) şekle, 120-200 mikron çapa, açıkça ifade edilen trofoblast ve embriyoblasta, yoğun bir hücreler arası komplekse sahip aynı boyutta blastomere sahiptir, bu da hücrenin kompaktlığını belirler. embriyo. Embriyolar, bulanık hücre zarları ve diğer dejenerasyon belirtileri ile farklı boyutlarda blastomerler içeriyorsa kusurlu kabul edilir.

Yıkama sıvısında, buruşuk, düzensiz bir sitoplazma ile dejenerasyon halindeki döllenmemiş yumurtaların yanı sıra şeffaf zarın bütünlüğünü, yırtılmalarını, delaminasyonlarını, boşluğun sıkışmasını, düzensiz parçalanmayı ihlal eden düzensiz şekilli embriyolar, hücre iletişiminin bozulması, sitoplazmanın granülasyonu da bulunabilir.

Blastomer parçalanmasında belirgin asenkroni belirtileri ile normal gelişimin keskin bir şekilde gerisinde kalan embriyolar, dejenerasyonları transplantasyon için uygun değildir ve hafif morfolojik değişikliklere sahip embriyolar şartlı olarak uygun kabul edilir.

Dondurulmuş embriyolarda önemli ölçüde daha büyük değişiklikler gözlenir; dondurma ve çözme, embriyoların yapısı üzerinde belirli bir iz bırakır, bu nedenle bunların değerlendirilmesi zor olabilir. 7-8 günlük embriyoların çok hücreli olmalarından dolayı yararlılığını doğru bir şekilde belirlemek her zaman mümkün değildir. Embriyo dejenerasyonu, yumurta kanalından geçerken morula aşamasında başlar, ancak morfolojik olarak bu, daha sonraki aşamalarda, uterus boynuzunda olduklarında kendini gösterir.

Greve (1980), embriyoları aşağıdaki göstergelere göre değerlendirmeyi önermektedir (Şekil 12.7).

Pirinç. 12.7.

Canlı embriyolar, avlanma gününden itibaren hesaplanan gelişim aşaması yaşlarına karşılık gelen embriyolardır. Bu tür embriyolar, tek tek blastomerlerin parçalanması, şişmesi, vakuolizasyonu veya dejenerasyonu olmaksızın küreseldir. 6-8. günlerde çıkarılan embriyolar çoğunlukla geç morula aşamasında, blastosist blastoselyum genişlemesinin başlangıç ​​veya geç aşamasında ve daha az yaygın olan yumurtadan çıkmış blastosist aşamasındadır. Senkronize alıcılarda nakil için en uygun olanlardır.

Retarded (retarded) embriyolar, yaşlarına göre beklenenden daha farklı gelişim evrelerinde olan embriyolardır. Gecikmiş oldukları veya daha sonra yumurtlayan foliküllerden türedikleri düşünülmektedir. Senkronize alıcılara nakledildiklerinde, aşılanma ve gelişmeye devam etme şansları daha düşüktür.

Bozuk biçimlendirilmiş (dejenere) embriyolar, yırtılmış, şişmiş veya vakumlanmış blastomerler veya parçalanmış sitoplazma ile karakterize edilen embriyolardır. Bu tür embriyolar transplantasyon için kullanılmaz.

Döllenmemiş yumurtalar, blastomerler ve perivitellin boşluğu olmayan homojen yumurtalardır. Bazen bir kutup gövdesi bulunur.

Wright (1984) embriyoları aşağıdakilere göre sınıflandırır: morfolojik özelliklerüç sınıfa ayrılır:

• 1) normal;
• 2) küçük sapmalarla;
• 3) artan sayıda dejenere hücre ile.

Elsden ve diğerleri (1978) embriyoları dörde ayırır.

notlar: kötü, orta, iyi ve mükemmel.

Ukrayna Orman-Bozkır ve Polissya Hayvancılık Araştırma Enstitüsü, embriyoları morfolojik özelliklere göre değerlendirmek için 5 noktalı bir sistem önerdi; embriyo gelişim aşamasını (morula ve blastosist) dikkate alarak farklılaştırılmış bir değerlendirme yaklaşımı sağlar (Tablo 12.2, 12.3).

Tablo 12.2

Morula derecelendirme ölçeği (erken morula - MO 1, geç - MO 2)

Tablo 12.3

Blastosist derecelendirme ölçeği (erken blastosist - BL 1, geç - BL 2)

Bazen deneyimsiz uzmanlar kompakt bir morulayı (6-7 günlük gelişim) döllenmemiş bir yumurta ile karıştırabilirler.

Embriyo ile yumurta arasındaki temel fark, blastomerlerin varlığı, şeffaf zarın 25 mikrona kadar incelmesi ve morula çapının biraz artmasıdır.

Mükemmel ve kaliteli embriyoların kullanılması, engraftrasyonlarında iki kat artış sağlar. Şüpheli durumlarda, yıkanan hücreler, 37°C'lik bir sıcaklıkta tanısal kültivasyon için bir termostatta 30-40 dakika (veya 12-24 saat) az miktarda besleyici ortama yerleştirilebilir. Yetersiz kalitede embriyolar reddedilir.

Embriyoların yaşayabilirliğini değerlendirmek için başka yöntemler önerilmiştir - fonksiyonel testler, özel boyalar, in vitro ve in vivo yetiştirme (bir tavşanın yumurta kanallarında), mikrometri, elektron mikroskobu vb.

Embriyo depolama Embriyoların alınmasından alıcılarına nakledilmesine kadar 2-3 saat geçer; değerlendirmeden sonraki bu süre zarfında embriyoların yaşayabilirliği korunmalıdır. Bunun için Dulbecco'nun fosfat tamponunda antibiyotik ilavesiyle yıkanır, az miktarda besiyeri ile birlikte mikro tepsilere emilir ve oda sıcaklığında saklanır veya bir saat camı üzerindeki 0,5 ml ortam içine yerleştirilir. Biyolojik olarak tamamlanmış embriyolar, tabanı nemli filtre kağıdıyla kaplı steril bir Petri kabına aktarılır ve bir termostata (sıcaklık 37°C) yerleştirilir.

Embriyoların canlılığını daha uzun süre koruma ihtiyacı, yeterli sayıda uygun alıcının olmaması, yıkanan embriyoların kalitesinin şüpheli olması, embriyo bankası oluşturma ihtiyacı gibi durumlarda ortaya çıkmaktadır.

gen havuzunun ülkeler ve kıtalar arasında ticari temelde değiş tokuşu için uzun vadeli programlar uygulamak amacıyla.

Embriyoları depolamak için çeşitli yöntemler önerilmiştir:

• 1) vücut dışında kısa süreli;
• 2) vücutta kısa süreli;
• 3) sıvılaştırılmış gazlarda uzun süreli (kriyoprezervasyon).

Embriyoların kısa süreli saklanması ve yetiştirilmesi. Embriyoların kısa süreli saklanması için bir yöntem geliştirirken, hücre ve dokuları kültürleme deneyimi dikkate alındı.

Embriyoların vücut dışında kısa süreli saklanması şu şekilde gerçekleştirilir. Dulbecco's, Ham-10, B2-Menezo's, modifiye Tyrode's veya Krebs-Ringer's solüsyonlarında tohumlama için ampul veya PVC pipetlere yerleştirilir. En uygun ortamın %20 cenin veya geyik kanı serumu ile takviye edilmiş TCM-199 ortamı olduğu ortaya çıktı. Çevre karbondioksit açısından zenginleştirilmelidir. Besiyeri bulunan embriyolar, kenarlarında 1-1,5 cm uzunluğunda hava boşlukları oluşacak şekilde pipetlerin içine emilir, pipetlerin uçları çelik bilyeler veya polietilen tüplerle kapatılır ve 37°C'de termostatta inkübe edilir. . Biyolojik olarak tamamlanmış embriyolar, 37°C'de bir vazelin yağı tabakası altında kültürlenebilir: bir Pasteur pipeti ile embriyolar, 0,5-1 ml ortam içeren steril bir test tüpüne aktarılır, steril vazelin yağı tabakalandırılır, ince bir folyo ile kaplanır ve termostata konur. Ayrıca 0,2 ml besiyerindeki embriyoları bir saat camı üzerine aktarabilir, bir tabaka (25 damla) vazelin yağı ile kaplayabilir, içinden ıslak gaz karışımının (%90 nitrojen) geçtiği bir desikatör üzerine yerleştirilmiş bir Petri kabına koyabilirsiniz. , %5 oksijen ve %5 karbondioksit) geçirilir.gaz).

biyolojik olarak canlı embriyolar optimal koşullar kültürler 24-48 saat canlı kalır.Kültivasyon sonunda embriyolar mikroskop altında değerlendirilir, canlı olanlar transplantasyon için kullanılır.

Gelişimin erken aşamalarında embriyolar, metabolik süreçlerin ters inhibisyonuna neden olan düşük pozitif sıcaklıklarda saklanabilir. 10°C'lik bir sıcaklığın embriyoların yaşayabilirliğini 5-6 güne kadar uzatmayı mümkün kıldığına dair raporlar var. Soğumaya en duyarlı olanlar, canlılıkları 10-15°C'de keskin bir şekilde azalan domuz embriyolarıdır. Sığır embriyoları, morula ve blastosist aşamalarında soğumayı iyi tolere etseler de, özellikle 8-16 blastomer aşamasında soğumaya karşı hassastırlar.

Embriyoların vücutta (tavşan yumurta kanalları) vücut sıcaklığında kısa süreli depolanması ve yetiştirilmesi (3-5 gün), müteakip yeniden nakil ile kıtalar arası taşınmalarına izin verir. Tavşanların yumurta kanallarına cerrahi olarak nakledilen koyun embriyolarının şeffaf kabuktan çıkıncaya veya implantasyona kadar normal geliştiği tespit edilmiştir. Sekiz blastomer ve morula aşamasındaki sığır embriyolarının da 72-96 saate kadar kültürlenebileceğine inanılmaktadır. laboratuvar ortamında, ve ardından bağlı tavşan yumurta kanallarında 7 güne kadar. Yöntemin dezavantajı, yıkama ve nakil sayısındaki artışa bağlı olarak artan yaralanma riskidir.

Embriyoların dondurulması (dondurulması). 1953 yılında O. Smith ilk kez tavşan embriyolarını dondurdu. 1971 - 1972'de Yurtdışında hayvan ve insan embriyolarının dondurulmasına yönelik amaçlı deneyler başlatıldı (R. Whittingham, D. Wilmuth, L.E.A. Rawson, Wiledsen ve diğerleri). SSCB'de embriyoların dondurulması ilk kez 1979'da gerçekleştirildi.

Sığırlarda dondurulmaya en uygun olanlar 7-8 günlük mükemmel ve kaliteli embriyolardır, yani; blastosist aşamasında (embriyoblast ve trofoblast olarak farklılaşan 60-150 blastomer) Koyun ve keçi embriyoları morula ve blastosist aşamasında 5-8. Günde, domuz embriyoları - 4-5. Günde dondurulur. Dondurma en iyi taze embriyolar tarafından tolere edilir.

Sığır embriyolarının transplantasyonuna ilişkin talimatlar (1987), bir elektronik birim, bir hazne ve sıvı nitrojen içeren bir kaptan oluşan yerli otomatik yazılım cihazı UOP-1 kullanılarak dondurmayı sağlar.

Seçilen embriyolar, kriyoprotektan - gliserol veya dimetil sülfoksit (DMSO) ile doyurulur. Kriyoprotektan, suyun kristalleşmesini önlemek için ortama eklenir. Kullanılan dondurma teknolojileri, embriyoların 20 ilaveli Dulbecco fosfat tamponu üzerinde hazırlanan artan konsantrasyonlarda (gliserol - 0.25; 0.50; 0.75; 1.0 M; DMSO - 0.35; 0.50; 1.0 ve 1.5 M ) kriyoprotektan solüsyonlarına sıralı transferini sağlar. % kan serumu ve penisilin. Her çözeltide, embriyolar 5-10 ve son - 15-20 dakika tutulur. Mükemmel kalitede embriyolar hemen 30 dakika süreyle 1,0 M gliserol veya 1,5 M DMSO içerisine yerleştirilebilir.

V.A. Yablonsky (1988) şuna dikkat çeker: Eğer kriyokoruyucu olarak gliserin kullanılıyorsa, o zaman embriyolar önce 10 dakika süreyle %3,3'lük bir gliserol çözeltisine, ardından 14 dakika süreyle %6,6'lık çözeltiye ve 30 dakika süreyle %20'lik çözeltiye yerleştirilir. Maruz kalma süresinin ortasında, embriyolar bir Pasteur pipetine bir dizi emme ile 5 dakika süreyle yıkanır ve salınır. Embriyolarla yapılan bu manipülasyonlar, petri kutularına yerleştirilmiş saat camları üzerinde gerçekleştirilir.

Ortamın kriyoprotektanlı embriyolarla doyurulmasından sonra, (her biri 0.3-0.4 ml kriyoprotektanlı ortam içeren 1-4 embriyo) test tüplerine, ampullere veya payetlere aktarılır, kapatılır (tüpler folyo ile kaplanır, ampuller kapatılır) , pipetin her iki ucu plastik tıpalarla kapatılır) ve programlı bir dondurucuya yerleştirilerek tek veya iki katlı yöntemle, yavaş veya hızlı bir şekilde dondurulur. Embriyolar şu sırayla payetlere yerleştirilir: orta-hava-ortam ve embriyo-hava-ortam.

Embriyoların yavaş dondurulması aşağıdaki gibi gerçekleştirilir. Embriyolar, GS/dk hızında 20'den 6-7°C'ye soğutulur. Önceden belirlenmiş bir sıcaklığa ulaştıktan sonra (buz oluşumunun başlamasından önce 4-5°C), ozmotik değişiklikleri önlemek için ortamın yapay kristalleştirilmesi sağlanır. Bu, çözeltiye buz taneleri, gümüş iyodür kristalin veya aşırı soğutulmuş bir nesnenin eklenmesiyle sağlanır (örneğin, cımbız veya ucunda donmuş bir ortam damlasıyla sıvı nitrojen içinde soğutulmuş bir pipet, folyoyu delip hızla yüzeye temas eder. ortam sütununun üst kenarındaki bölgede test tüpünün veya ampulün sıvısı veya duvarı). Daha fazla soğutma, -35 ila -36°C arasında 0,3°C/dk hızında gerçekleştirilir ve ardından hızla sıvı nitrojene daldırılır.

Kullanımdan önce, yavaş yavaş donmuş embriyolar, içine embriyolu test tüplerinin veya ampullerin yerleştirildiği -50 ° C sıcaklıktaki cam silindirik bir şişede bir alkol banyosunda eritilir. Çözdürme oda sıcaklığında 4°C/dk ile -10°C arasında gerçekleştirilir ve ardından embriyolar 5 dakika süreyle 20°C sıcaklıktaki su banyosuna aktarılır. Son olarak, embriyolar, kriyoprotektanı uzaklaştırmak için kullanılan ortama aktarılır.

Fransa'da önerilen hızlı embriyo dondurma teknolojisi, gliserol ve sukroz içeren bir ortamın (Dulbecco'nun fosfat tamponu + kan serumu) kullanımına dayanmaktadır. Aşağıdaki gibidir. 0,5 M sükroz solüsyonu, hava, embriyo ile 1,0 M gliserol solüsyonu, hava, 0,5 M sükroz solüsyonu sırayla pipete emilir. Embriyolar 20°C'den -7°C'ye GS/dak hızında soğutulur, yapay kristalleşme uyarılır, ardından 0.3°C/dk hızında -35'ten -36°C'ye soğutulur ve ardından -60°C'ye 0,1 °C/dak hızla ve sıvı nitrojene aktarılır.

Dondurulmuş embriyoları (kullanmadan önce) 37°C'lik bir su banyosunda 30 saniye süreyle 3°C/dak hızında veya 10-12 saniye süreyle çözün. Bunu yapmak için, pipet (test tüpü, ampul) sıvı nitrojene batırılmış teneke kutudan hızla çıkarılır ve bir su termostatına indirilir.

Çözülmüş embriyolar, ortamla birlikte, morfolojik değerlendirme için bir test tüpünden veya ampulden bir saat camına aktarılır. Embriyolar normal kalitede ise, gliserin veya DMSO'dan yıkanır, sırayla önceden hazırlanmış azalan konsantrasyonlu kriyoprotektan solüsyonlarına yerleştirilir. Son aşamada gliserolsüz ortamda 3 defa yıkanır ve 10-20 dakika bekletilir. Yıkama sonunda embriyolar canlılık açısından tekrar değerlendirilir ve uygun bulunanlar transplantasyon için cihaza yüklenir.

Çözüldükten sonra pipet 3-4 kez çalkalanarak hava kabarcıkları giderilir ve içeriği karıştırılır, ardından 15 dakika dik konumda bırakılır. Saman duvarından bir aptalla, bir embriyo bulunur ve yaşayabilirliği değerlendirilir.

Ukrayna SSR Orman-Bozkır Hayvancılık Araştırma Enstitüsü ve Polissya aşağıdaki koruma teknolojisini önerdi: morula aşamasında yeni yıkanmış embriyolar 10 dakika süreyle PBS ortamında 0,5 M DMSO çözeltisine, ardından 20 dakika süreyle 1,3 M DMSO ile aynı besiyerinden sonra 3-4 embriyo 0,5 ml FBS ve 1 M DMSO içeren test tüpüne aktarılır. Tüp kapatılır ve bir soğutucu ve dondurucuya yerleştirilir. Daha fazla rahatlık için, embriyolar, önce embriyo ile ortamın "/ 4 hacmini, ardından bir hava kabarcığı ve "/ 4 hacim FBS ortamını" topladıkları özel mini pipetlere yerleştirilebilir. Pipet daha sonra kapatılır ve bir dondurucuya aktarılır.

Dondurma işlemi aşağıdaki programa göre gerçekleştirilir: 22-25°C'den 6°C'ye GS/dak hızında soğutulur, ortamın kristalleşmesi yapay olarak uyarılır, -6'dan -40°C'ye GS/dk hızında dondurulur. 0,3°C/dk ve -40 ila -60°C - 0, GS/dk hızında, ardından -60°C'ye soğutulmuş embriyolara sahip test tüpleri sıvı nitrojene aktarılır.

Bazı ülkeler embriyoları dondurmak ve çözmek için kendi teknolojilerini geliştirdiler - iki aşamalı, tek aşamalı, payetlerde, aynı anda iki besiyeri içeren payetlerde - dondurmak için (% 10 gliserin içeren Dulbecco sıvısı ve içindeki embriyo) ve çözme ortamı (%20 fetal serum veya 4 g/l sığır albümini ve 0,5 M sukroz çözeltisi içeren Dyulbecco sıvısı). Çözüldükten sonra medyum karıştırılır, pipet oda sıcaklığında 10-20 dakika bekletilir ve embriyo alıcıya nakledilir.

Ortamın hazırlanması ve embriyoların dondurulması ile ilgili tüm çalışmalar asepsi gerekliliklerine uygun olarak gerçekleştirilir.

Dondurulmuş embriyolar, özel kutulara yerleştirildikleri sıvı nitrojenle (örneğin, Kharkov 34B markası) doldurulmuş bir Dewar kabında saklanır.

Dondurulup çözüldükten sonra embriyoların %44-63'ü canlı kalır.

Cinsel döngünün uyarılma aşamasının senkronizasyonu (avlanma).İçin

Taze elde edilmiş embriyoların transplantasyonunda, donör ve alıcılarda östrus tezahürünün sağlanması gereklidir. Senkronizasyonun özü, alıcılarda ve donörlerde cinsel işlevi düzenlemek için ayrı tekniklerin veya hormonal ajanların kullanımına indirgenerek, bunların önceden belirlenmiş bir zamanda aynı anda cinsel uyarılmayı sahnelemelerine neden olur.

Büyük sürülerde her gün yeterli sayıda av hayvanı bulunur. Ancak kaç dişide ve ne zaman geleceğini kestirmek güç. Bu nedenle, pratik koşullarda, çoğu zaman cinsel döngünün uyarılma aşamasının yapay olarak uyarılmasına ve alıcılarda senkronizasyonuna başvururlar. Bu amaçla, korpus luteumun işlevini uyarmaya veya uzatmaya veya tersine işlevini engellemeye dayanan hormonal yöntemler sıklıkla kullanılır.

İlk durumda, progesteron enjeksiyonları veya çeşitli metodlar sentetik analoglarının - progestojenlerin (klormadinon asetat veya CAP, medroksiprogesteron veya MPA, melengestrol asetat veya MGA, megestrol asetat, amol, diamol 1C1-79939, 1C1-80996, vb.) hipofiz bezi, FSH ve LH sentezini bozmadan, korpus luteumun varlığını ve kanda yüksek progesteron seviyesini korur. Aynı zamanda foliküller sadece ikinci aşamaya kadar olgunlaşırken, östrus, östrus, genel reaksiyon ve yumurtlamanın başlaması engellenir. Hayvanlara progesteron veya progestojen uygulamasının kesilmesine, hipofiz hormonlarının yoğun bir şekilde salınması ve dişilerde cinsel döngünün uyarılma aşamasının ortaya çıkması eşlik eder.

Bununla birlikte, hayvanlarda cinsel döngünün uyarılma aşamasının başlama zamanı büyük ölçüde değişir - 2 ila 6 gün arasında, yumurtaların döllenmesi azalır. Bu nedenle, cinsel fonksiyonun bu yöntemle senkronizasyonu, embriyo nakli teknolojisinde sınırlı bir öneme sahiptir. F2 grubunun prostaglandinleri ve sentetik analogları - prostin (ABD), kloprostenol, estrumat (İngiltere), estrofan (Çekoslovakya), enzaprost (Macaristan), vb. Yardımıyla cinsel döngünün senkronizasyonu ile değiştirildi. Belirgin bir luteolitik ve uterotonik etkiye sahip olan, korpus luteumun morfolojik ve fonksiyonel gerilemesine neden olur ve böylece cinsel döngünün süresini kontrol eder.

İneklerde (düvelerde) cinsel döngünün (avlanma) uyarılma aşamasını senkronize etmek için çeşitli şemalar geliştirilmiştir. Bunlardan biri, 11 gün arayla iki estrofan enjeksiyonunu içerir. tekrar

PMSG donörüne enjeksiyondan sonraki 2. gün veya FSH-P tedavisine başlandıktan sonraki 3. gün estrofan verilir. Şemalardan herhangi birini kullanırken, alıcı güçlendirilir: trivitamin veya trivit, 1., 10-12. ve 21-23. günlerde 15 ml'lik bir dozda kas içine enjekte edilir.

Verici hayvanlar östrus ve cinsel uyarılma belirtileri açısından izlenir ve ısı için üç kez test edilir. Alıcı, ava başlama tarihlerinin tamamen çakışması durumunda donöre atanır. Embriyo transferinin yapıldığı gün, donör ve alıcıların yumurtalıklarının rektal palpasyonu fonksiyonel olarak aktif bir korpus luteum olduğundan emin olur.

Koyun ve keçilerde avlanma senkronizasyonu şu anda şu şekilde gerçekleştirilmektedir:

• 1) progestojenlerin deri altı implantlar veya vajinal yaralar şeklinde kullanılması (progestojenle emprenye edilmiş ince gözenekli poliüretan süngerler);
• 2) F2 grubu prostaglandinlerin 9-10 günlük aralıklarla çift enjeksiyonu yoluyla;
• 3) Vericilerle aynı gün avlanan koyunlar arasından alıcı gruplarının oluşturulması.

Dişi domuzlarda ısı senkronizasyonu, domuz yavrularının sütten kesilmesinden sonra progestojenlerin uygulanması veya laktasyondaki uterusa gonadotropinlerin uygulanmasıyla gerçekleştirilir. Aynı zamanda genç domuzlara 900-1800 mg PMSG ve 2 gün sonra 500 IU hCG enjekte edilir; bisikletli domuzlara aşağıdaki şemalardan birine göre hormonal müstahzarlar uygulanır:

• Döngünün 16. gününde PMSG ve 19. gününde hCG;
• 20. günde metallibur, 21. günde PMSG ve 23. günde HCG;
• 19. günden 21. güne kadar progestin trenbolon, PMSG'den 6 saat sonra

progestojenin son verilmesi ve 78 saat sonra - hCG;

• 14. günden 20. güne kadar, oksolven, 24 saat sonra, surfogon (400 IU GSFA,
• 200 IU hCG) ve son progestojen uygulamasından 70 saat sonra -

Yaşlı dişi domuzlara, sütten kesilen domuz yavrularının olduğu gün veya 1 gün sonra ve 2-3 gün sonra - hCG - PMSG enjekte edilir. Domuz yavrularını sütten kestikten sonra 18. günde stimülasyona başlayabilirsiniz.

Kısraklarda avlanma, 0.044 mg/kg f.m. 15 gün içinde veya bir prostaglandin analoğu olan fluprostenol (equimat) 14 gün ara ile 25 M/kg dozda kullanımı. Yumurtlamayı uyarmak için kısraklara ayrıca 2000-3000 IU hCG enjekte edilir.

Embriyoların preplantasyonu (transplantasyonu). 1970'lerin ortalarına kadar. Embriyo transferi ağırlıklı olarak cerrahi yöntemle yapılıyordu, ardından ameliyatsız yatağa geçilmeye başlandı. Her birinin olumlu ve olumsuz yanları vardır.

Sığırlarda embriyo nakli. Embriyo transferinin cerrahi yöntemi, evrensel bir sabitleme makinesi veya ameliyat masası ile donatılmış bir ameliyathanede yapılması gereken bir karın ameliyatıdır. Lokal anestezi altında dorsal pozisyonda veya inhalasyon bölgesinde (hungry fossa) yatan hayvanda genel anestezi altında karın beyaz çizgisi boyunca laparotomi ile uterusa erişim sağlanır. Hayvanın ameliyat için hazırlanması ve rahme cerrahi erişim, rahmin yıkanması ile aynıdır. Karın duvarında sağ veya sol aç fossa bölgesinden yapılan bir kesi ile embriyo transferi çok daha basit ve daha az zahmetlidir.

Embriyo transferi için bir araç olarak, kapilerin ucunda huni şeklinde bir uzantı ve karşı ucunda hermetik kauçuk kapak bulunan modifiye edilmiş bir Pasteur pipeti kullanılabilir. Önce bir kolon Dulbecco ortamı (1.5-2 cm) pipete çekilir, ardından aynı hava kolonu çekilir, ardından ortamla birlikte embriyo emilir ve yine bir hava sütunu ve bir ortam sütunu çekilir. Pipetin üzerine steril bir polietilen örtü konulur veya steril bir peçete ile örtülerek yatay konumda bir kutu içerisinde ekime kadar bekletilir.

İç organlara erişim açıldıktan sonra, işleyen bir korpus luteum ile yumurtalığa bitişik olan uterus boynuzu kesiğe kadar çekilir, kılcal borunun ucuyla (veya 10 cm çapında künt bir iğne ile) duvar delinir. 1–1,5 cm veya bir süt kateteri ile, ardından kapiller açıklığa bir pipet sokularak) uterus tubal bileşkesinden yaklaşık 5 cm uzağa ve pipetin içeriğini uterus boynuzunun lümenine, mukoza zarına sıkın . Bu durumda rahim duvarlarına dokunamazsınız; kan damarlarının hasar görmesi ve kanamadan kaçınılmalıdır.

Gerekirse ikinci embriyo da başka bir rahim boynuzuna aktarılır. Nakil tamamlandıktan sonra uterusun orijinal pozisyonunu alıp almadığını kontrol ederler ve karın boşluğuna 250 ml antibiyotikli salin enjekte ederler (50 ml novokain solüsyonunda 500 bin üniteye kadar penisilin ve streptomisin). Üç katlı dikiş ve yapışkanlı bandaj uygulanır, alıcı iki hafta müşahede altında bırakılır.

Cerrahi nakilden sonra ineklerin %52-90'ı (ortalama olarak yaklaşık %60'ı) gebe kalmaktadır. Cerrahi embriyo transferinin yüksek etkinliği göz önüne alındığında, ABD, Kanada ve Avustralya'daki birçok merkez bu yöntemi ağırlıklı olarak kullanmaktadır. Ancak kas rezeksiyonu sonucunda hayvanda meydana gelen yaralanmalar, hayvanın tekrar kullanılabilir kullanımının imkansızlığı ve operasyonun karmaşıklığının cerrahi yöntemin yaygın olarak kullanılmasına engel olduğu unutulmamalıdır.

Mİ. Prokofiev, V.Ya. Yarnykh (1986), düşük epidural anestezi arka planına karşı pelvik duvar ponksiyonu yoluyla embriyo transferi için bir yöntem ve cihaz önerdi. Kornanın delinmesi ve embriyonun girişi rektum yoluyla elle kontrol edilir.

Sugi (1965), servikal kanalı atlayarak vajinal forniksteki bir açıklıktan embriyoları uterusa sokmanın mümkün olduğu bir alet tasarladı.

Embriyo transferi tekniğini basitleştirme arzusu, bir embriyonun servikal kanal yoluyla rahim boynuzuna transferini içeren cerrahi olmayan bir yöntemin geliştirilmesine yol açtı, yani; suni tohumlama ilkesine göre. Ameliyatsız embriyo transferi ile ilgili ilk deneyler 1960'ların başında yapıldı. Cerrahi olmayan embriyo transfer yönteminde çeşitli modifikasyonlar önerilmiştir. Alıcılara embriyo nakli av bitiminden sonraki 7-8. Günlerde gerçekleştirilir.

Ameliyatsız embriyo transferi için teknoloji geliştirilirken aşağıdaki özellikler dikkate alınmıştır. İlk olarak, nakil sırasında alıcının servikal kanalı sıkıca kapatılır, reseptörlerin hassasiyeti artar, buna bağlı olarak servikal kanalın mekanik olarak açılmasına yanıt olarak miyometriyumun kasılma fonksiyonu aktive edilir. , embriyonun dışarı atılmasına yol açabilir. İkincisi, cinsel döngünün luteal fazında, endometriyum mikrobiyal faktöre karşı artan hassasiyet ile karakterize edilir. Üçüncüsü, kan damarlarında hasar ve embriyotoksik etkiye sahip olan kanın uterus boynuzlarının boşluğuna girmesi mümkündür.

Transplantasyon öncesi alıcının embriyosu makinede sabitlenir, kuyruğu bandajlanır ve hayvanın boynuna bağlanır, vulva ve perine ılık su ve sabunla yıkanır, %2'lik diosit solüsyonu veya %70'lik etil alkol ile dezenfekte edilir, düşük sakral epidural anestezi, %2'lik novokain solüsyonu (5 mi) gerçekleştirilir ve yüksek derecede uyarılmış hayvanlara ayrıca kas gevşetici kombelen (0.5 mi) enjekte edilir. Rahim reseptörlerini bloke etmek ve embriyo reddini önlemek için hanegif ilacının kas içinden kullanılması önerilmektedir.

Şu anda kullanımda olan aletler, önünde embriyonun minimum hacimli bir ortama yerleştirilmesi için bir ataşman bulunan metal bir kateterden, uzun bir kılcal tüpten oluşmaktadır. Uterus boynuzuna rektum yoluyla sürekli el kontrolü altında bir kateter sokulur (serviksin rektal fiksasyonu ile servikal tohumlamada olduğu gibi) ve embriyo ek yerinden uterus mukozasına sıkıştırılır.

Cerrahi olmayan embriyo transferi, bir tüp, bir itici ve bir vidalı uçtan oluşan modifiye bir metal Kassu kateteri (Şekil 12.8) kullanılarak gerçekleştirilebilir. Cihaz 30 dakika kaynatılarak sterilize edilir, kurumaya bırakılır ve embriyo transferi başlayana kadar masa üstü bakterisit hücrede lambası açık olarak bekletilir. Alet, belirli bir esneklik sayesinde, embriyoların uterus boynuzunun orta kısmına yerleştirilmesine izin verir. Rasbeck aleti rahim boynuzunun herhangi bir yerine yerleştirilebilecek şekilde modifiye etti.

Pirinç. 12.8.

Embriyo şu sırayla steril bir kamışa emilir: ortam, hava kabarcığı, embriyolu ortam, hava kabarcığı, ortam, plastik tıpa. Doldurulan pipet kateterin ucuna yerleştirilir, sonuncusu tüpe vidalanır. Kullanıma hazır olan cihaz embriyo transfer teknisyenine aktarılır veya 37°C sabit sıcaklıktaki termostata kısa süreliğine yerleştirilir.

Embriyo transferi için içi doldurulmuş pipet ile hazırlanan Cass kateter alıcının vajinasına sokulur, daha sonra rektumda elin kontrolünde servikal kanaldan yumurtalık tarafındaki uterin boynuzun ortasına kadar ilerletilir. korpus luteum. Cihazın doğru yerleştirildiğinden emin olduktan sonra, pipetin içeriği yavaşça uterus boynuzunun lümenine itilir. Bundan sonra, kateter dikkatlice çıkarılır ve işlenmek üzere aktarılır.

VIZh tarafından geliştirilen cerrahi olmayan embriyo transferi için önerilen cihaz aşağıdakilerle ayırt edilir: Tasarım özelliği: 55 cm uzunluğunda, 3 mm çapında bir kateter, 45 cm uzunluğunda ve 4,5 mm çapında, ucunda huni şeklinde bir uzantı bulunan ve bir adaptör kullanılarak bir mikro şırıngaya bağlanan metal bir borudan geçer. Plastik (üretral) kateterin uç kısmı kabul edilen sırayla (FBS ortamı - hava - embriyonun bulunduğu ortam - hava - FBS ortamı) embriyo ile doldurulur. Genital sisteme sokulmadan hemen önce, cihaz polietilen filmden yapılmış hijyenik bir örtü ile kapatılır. Aleti önceki durumda olduğu gibi sterilize edin, silikonu preparasyonla kaplayın. Embriyoyu başka bir çiftliğe transfer etmek gerekirse, sıcak (37°C) yüklü bir kateter dikkatlice sarılır, yalıtılmış bir kaba (veya suyla dolu suni bir vajinaya) yerleştirilir ve ani şoklardan kaçınılarak yatay pozisyonda taşınır. ve eğimler. Embriyolu yedek payetler aynı kapta 37°C'de taşınabilir.

Embriyo nakli şu şekilde yapılır: sağ el ile vajinanın üst forniksi boyunca genital boşluktan servikse metal bir tüp sokulur, koruyucu kapak çıkarılır; rektuma yerleştirilen sağ elin kontrolü altında, servikal kanaldan boynuzun tepesine, yanında yumurtalıkta bir korpus luteum bulunan plastik bir kateter yönlendirilir; şırınga pistonuna hafifçe bastırılarak, kateterin ucunda bulunan embriyo, besin ortamı ile birlikte dışarı itilir.

Benzer şekilde, diğer uterus boynuzuna bir kateter yerleştirilerek iki taraflı (bilateral) embriyo transferi gerçekleştirilebilir, ancak bunların kontralateral boynuzda hayatta kalma oranları biraz daha düşüktür. Kol, ancak nakil tamamlandıktan sonra rektumdan çıkarılmalıdır.

Embriyo transferi VIZh tarafından geliştirilen iki kanallı bir cihaz kullanılarak yapılıyorsa, o zaman ilk embriyonun uygulanmasından sonra cinsel organlardan sadece plastik bir kateter çıkarılır ve rahim ağzında kalan metal tüp başka bir uterusa yönlendirilir. Boynuz. İçine dolu başka bir kateter yerleştirildikten sonra boynuzun tepesine yakın ilerletilerek embriyonun tekrar uygulaması gerçekleştirilir. Embriyo transferi Fransız şirketi IM V'nin teleskopik bir kateteri kullanılarak gerçekleştirilirse, metal gövdesine bir rondela ile sabitlenen plastik bir kapak konur. Kateterin içinde bulunan kayar metal tüp ileri doğru itilir, embriyonun bulunduğu ortamla dolu olan prob (aspirion) buna bağlanır ve kanül durana kadar kateterin içine çekilir. Üstüne bir sıhhi örtü konur ve alet vajinanın üst forniksi boyunca servikse sokulur. Rektal kontrol altında serviks ağzına yönlendirilir, kapak delinir ve servikse hafifçe masaj yapılarak kateter, ipsilateral boynuzu bükülene kadar servikal kanaldan uterus boşluğuna sokulur. Metal bir tüp kullanılarak aspibrion kateterden dışarı çekilir, kıstağa en yakın noktaya getirilir ve metal bir piston kullanılarak embriyo uterus boynuzuna itilir.

Embriyo naklinin başarısı büyük ölçüde asepsi ve antisepsi kurallarına uyulması, genital organlara travmanın önlenmesi, teknisyenin becerisi ve alıcının sağlığı ile belirlenir.

Embriyo nakli sonrası hayvan-alıcıların tam teşekküllü beslenmesi sağlanır, günlük aktif egzersiz sağlanır. Transplantasyondan sonraki 2 ay içinde alıcıları aşılamak, yeniden gruplandırmak veya diğer stresli etkilere maruz bırakmak önerilmez.

Gebeliğin teşhisi üç aşamada gerçekleştirilir. İlk aşamada, nakilden sonraki 7-12. Günde refleksolojik bir çalışma (sonda ile) yapılır. Gebeliğin 14.-18. gününde, kandaki veya sütteki progesteron düzeyine göre hormonal bir yöntem teşhis edilir (güvenilirlik - yaklaşık% 85). Nakilden 2 ay sonra rektal muayene ile gebelik teyit edilir. Son olarak, transplantasyonun etkinliği gerçek buzağılama ile değerlendirilir.

Ameliyatsız nakil yöntemi ile embriyoların hayatta kalma oranı %40-50 veya daha fazladır.

Diğer hayvanların embriyolarının nakli. Koyunlarda embriyo transferi sadece cerrahi olarak genel veya lokal anestezi altında karın beyaz çizgisi boyunca laparotomi ile gerçekleştirilir. 1978'de İngiltere ve Polonya arasında ilk uluslararası donmuş koyun embriyosu değişimi gerçekleşti. 1979 yazında, sıvı nitrojende yaklaşık bir yıl saklanan ve uçakla Krakow'dan Sofya'ya taşınan donmuş embriyoların nakli üzerine bir Polonya-Bulgar deneyi gerçekleştirildi. En iyi sonuçlar 8-16 blastomer aşamasındaki embriyoların nakledilmesiyle elde edilir.

C. Polju ve B. Bey (1969), cerrahi olmayan nakilden sonra 32 domuzdan birinde gebelik elde etmesine rağmen, domuzlarda embriyo transferi cerrahi olarak gerçekleştirilir. 12-16 embriyonun bir alıcıya transferi optimal kabul edilir. Embriyoların avlanmadan 5 gün sonraya kadar hayatta kalma oranı %60'tır, daha sonra keskin bir şekilde düşer (Prokofiev M.I., 1983). 1.22 mm çapında silikonize bir kateterin yumurta kanalından uterus boynuzuna sokulduğu, laparoskopi kullanılarak bir transplantasyon yöntemi geliştirilmiştir. Domuzlar embriyoların iç göçünü yaşadıklarından, yalnızca bir rahim boynuzuna nakledilebilirler. Dörtten az embriyo transfer edildiğinde gebelik korunmaz.

Kısraklarda yumurtlamadan sonraki 1-3. gün karın beyaz çizgisi boyunca laparotomi ile cerrahi embriyo transferi gerçekleştirilir. Bir Pasteur pipeti kullanılarak embriyo, az miktarda ortam içinde yumurta kanalına verilir. 4-6 günlük embriyolar uterus boynuzunun apeksine nakledilir (verimlilik %53-60). Kısraklarda serviksin boyutu ve yapısı, cerrahi olmayan embriyo alımı ve nakli için bir kateterin yerleştirilmesini kolaylaştırır. Kısraklarda embriyo transferi suni tohumlama için kullanılan 55 cm'lik pipet kullanılarak yapılabilmektedir. Yumurtlamadan transplantasyona kadar geçen süre arttıkça embriyoların aşılanması artar. Kısrak embriyoları, nakliyeleri de dahil olmak üzere tavşanların yumurta kanallarında canlı kalır.

At yetiştiriciliğinde yöntemin yayılması sınırlıdır, çünkü ilk olarak, eksojen gonadotropinler yardımıyla kısraklarda süperovulasyonu indüklemek zordur, bu nedenle değerli kısraklardan yavru sayısında bir artış tekrar tekrar elde edilebilir. ameliyatsız bir şekilde tek embriyo elde edilmesi ve ikincisi, Safkan Atları Tescil Derneği suni tohumlama veya embriyo transferi ile elde edilen yavruları tanımamaktadır.

Transplantasyon, yüksek değerli hayvanlardan (donörler) bir veya daha fazla embriyo elde edip daha az değerli hayvanlara (alıcılar) transfer ederek yüksek verimli hayvanların hızlandırılmış üreme yöntemidir. Transplantasyon kullanımı, genetik olarak değerli bir dişiden onlarca kat daha fazla yavru elde etmeyi mümkün kılar. Embriyo nakli için en kabul edilebilir olanlar kısır hayvan türleridir: inekler, atlar, koyunlar. Dünya hayvancılık pratiğinde embriyo nakli yöntemi daha çok süt ve besi sığırı yetiştiriciliğinde kullanılmaktadır. Seçilen bir donör inekten elde edilen embriyoların nakli için alıcılar kullanılarak, yavru sayısını onlarca, yüzlerce kat artırmak mümkündür. Teorik olarak, genetik olarak üstün donör bir inekten hayatı boyunca en az 500 buzağı elde edilebilir. Sığır embriyo naklinde büyük ilerlemeler kaydedilmiş ve bunun sonucunda bu yöntem modern ıslah programlarında sağlam bir yer edinmiştir. Transplantasyon yöntemi, suni tohumlama ile birlikte, yüksek verimli damızlık hayvanların çoğaltılması için modern biyoteknolojinin temeli olarak kabul edilir. Embriyo nakli teknolojisi birbirini takip eden bir dizi aşama içerir: donör seçimi; donörlerde süperovülasyon; üreticilerin seçimi ve donörlerin tohumlanması; embriyo kurtarma ve değerlendirme; embriyoların kültürlenmesi veya dondurulması; alıcıların seçimi ve eğitimi; embriyoların alıcılara transferi; transplantasyon sonuçlarının değerlendirilmesi.

Gelişimin erken bir aşamasında bir embriyonun fotoğrafı.

hileler:

1) süperovulasyonun hormonal indüksiyonu;

2) donörlerin, yavruların kalitesine göre değerlendirilen üreticilerin semeni ile tohumlanması;

3) embriyoların ekstraksiyonu ve kalite değerlendirmesi, embriyoların sıvı nitrojen içinde saklanması ve nakli veya dondurularak saklanması, çözülmesi ve nakli.

Hedefler:

1) genetik olarak değerli bireylerin üremesi;

2) erken embriyoları ayırarak aynı hayvanları elde etmek.

3) mutant genlerin, küçük popülasyonların korunması;

4) infertil fakat genotipe göre genetik olarak değerli hayvanlardan yavru elde edilmesi;

5) zararlı resesif genlerin ve kromozomal anormalliklerin saptanması;

6) hayvanların hastalıklara karşı direncini arttırmak;

7) ithal edilen yabancı cins hayvanların iklime alıştırılması;

8) embriyonun cinsiyetinin belirlenmesi ve belirli bir cinsiyetten hayvanların elde edilmesi;

9) türler arası nakiller;

10) farklı hayvanların blastomerlerinden elde edilen erken embriyolardan gelişen kimerik hayvanların elde edilmesi.

Kısa tarih

Tavşanın şap hastalığına karşı bağışık olduğu bulunduğunda, şap hastalığı ile enfekte olmuş hayvanların yavrularını iyileştirmek için transplantasyon yönteminin kullanılması fikri ortaya atıldı. Embriyoların nakledildiği tavşanın genital yolu, embriyolardaki FMD virüsünü yok etme yeteneğine sahiptir. Transplantasyon, embriyoların geçici olarak saklanması için de kullanılabilir. Tavşanların yumurta kanallarında koyun embriyolarının kıtalar arası taşınması mümkündür. 1970'li yıllara kadar embriyoların çıkarılması esas olarak ameliyatla yapılırdı, daha sonra yerini doğal bir kanaldan rahim içine özel bir sondanın sokulmasına dayanan daha az travmatik ve zaman alan ameliyatsız bir yöntem aldı. Probun üç kanalı vardır. Kanallardan biri, rahim boynuzunu tıkayan ve sıvının kaçmasını engelleyen balonu şişirmek için tasarlanmıştır. 25-30°C sıcaklıktaki fizyolojik çözelti, embriyoları yıkayan ve onlarla birlikte sondanın üçüncü kanalından 35°C sıcaklıktaki bir su banyosuna yerleştirilmiş bir test tüpüne geri dönen başka bir kanaldan verilir. Embriyolar bu sıvıdan çıkarılır. Ortalama olarak, bir donörden süperovülasyon ile 5 ila 7 embriyo alabilirsiniz. Ekim, tohumlama için özel bir sonda veya tabanca kullanılarak gerçekleştirilir. Embriyolar rahim boynuzlarına yerleştirilir. Kadın alıcılarda gebelik 21. günde kan plazmasındaki progesteron düzeyine bakılarak kontrol edilir. Kat düzenlemesi. Damızlık hayvan uygulamalarında, yavrularda erkek ve dişi bireylerin oluşumunun nasıl yönetileceğinin öğrenilmesi çok önemlidir. Embriyoları cinsiyete göre ayırma yöntemi, erkeklere özgü proteinlerin belirlenmesine dayanmaktadır. Bu yöntem birçok ülkede hayvancılık pratiğinde yaygın olarak kullanılmaktadır. 1975'ten beri buzağılar, embriyo aşamasında cinsiyete göre ayrılmış olarak Kanada'da doğmaktadır. Gelecekte, erkek veya dişi bireylerin hedeflenen üretimi için, X ve Y kromozomlarının mikrocerrahi olarak değiştirilmesi yöntemi kullanılabilir. Bu tür manipülasyonlar, bitki hücreleri ve amfibi yumurtaları üzerinde zaten gerçekleştirilmiştir.

Günümüzde tüp bebek işlemi, kendi başına çocuk sahibi olamayan hemen hemen her kadının başvurabileceği rutin bir manipülasyon olarak kısırlık tanısı alan hastaların hayatına girmiştir. Birkaç on yıl önce, bu tür yardımcı üreme tıbbı yöntemlerine neredeyse hiç kimse erişemezdi. Bu teknik, üreme tıbbı alanındaki en son teknolojiler kullanılmadan var olma şansı bulamayacak binlerce çocuğa hayat vermiştir. Eco kuyruğu nasıl kontrol edilir?

Embriyo transferi yaptıran bir kadın nasıl hissedebilir ve hamile hissedebilir?

Böyle bir manipülasyondan sonra hasta aşağıdakilerden şikayet edebilir:

• Alt karın bölgesinde çizim, ağrıyan ağrı;
• Genel zayıflık hissi;
• Kusma ve mide bulantısı.

Bunlar, hamileliğin durumu hakkında herhangi bir doğru bilgi taşımayan öznel duyumlardır. Bu belirti ve şikayetler protokolde kullanılan ilaçların kullanımından kaynaklanabilir. Kadının psiko-duygusal ve fiziksel stresini sınırlamaktan ve alçakgönüllülükle beklemekten başka seçeneği yoktur.

Yeniden dikmenin başarılı olduğunu gösteren ilk güvenilir implantasyon belirtileri iki hafta sonra ortaya çıkar, ancak bazıları bir dereceye kadar daha erken rahatsız edebilir.

Bazı kadınlar, genişlemiş rahmin vücuda yaptığı baskı nedeniyle sık idrara çıkma ile kendini gösteren dizüri yaşayabilir. mesane. Hamilelik sırasında yüksek dozda progesteron etkisi nedeniyle meme büyümesi ve ağrıları da hamilelik belirtisi olabilir. Ve bazı kadınlar zaten depresif bir durumda iç çamaşırlarında bir damla kanın ortaya çıkmasından şikayet ediyor, bunların başarısız IVF belirtileri olduğundan emin olarak gözyaşları içinde doktorlarına koşuyorlar.

Ancak bu semptomların ortaya çıkması her zaman olumsuz sonuçlara işaret etmez. Genellikle, implantasyon sürecine endometriyumun küçük damarlarına travma eşlik eder ve embriyonun endometriyuma başarılı bir şekilde implante edildiğini ve hamileliğin başlangıcını işaret edebilen tam tersi bu semptomdur. Bunun hakkında daha fazlası. IVF'den sonra ne zaman gebelik testi yapacağınızı doktorunuza danışmanız gerekir.

Ve adet kanamasının gecikmesi gibi bir işaret bile ilk günlerde iyi ya da kötü bir şey söylemeyecektir. Hem hamileliğin başlangıcının kesin bir işareti olabilir hem de yokluğunda tüp bebek protokolünde ilaç almakla ilişkili hormonal yetmezliğin nedeni olabilir.

Ve sadece hCG seviyesi için bir kan testi veya bir ultrason taraması, bir kadının hamile olup olmadığı sorusuna cevap garantisi verebilir. Veya pozitif test hamilelik için Pozitifin aksine, düşük hCG seviyesi ve başarılı bir şekilde gelişen uterus gebeliği nedeniyle gecikmenin ilk günlerinde negatif olabilir.

Laboratuvar teşhisi sırasında doktorlar 50-100 IU / ml'ye eşit bir gösterge alırlarsa, bu değerler şüpheli olarak kabul edilir, ancak luteal fazın progesteron preparatları ile desteklenmesi devam eder. Sonuçlar 200-100 Med / ml'nin üzerindeyse hamileliğin başarılı seyrini yargılayabiliriz ve 300'ün üzerindeki göstergelerle rahimde çoğul gebelik olduğunu varsayabiliriz.

IVF sırasında embriyoların hayatta kalması birçok faktöre bağlıdır ve çoğu durumda başarısız protokolün neden olduğunu tam olarak söylemek imkansızdır. Hamileliğin progesteron ile doğru desteklenmesinden ve tüp bebek embriyo transferinden sonra hangi semptomların gün geçtikçe kontrol altına alınmasından.

İmplantasyon gerçekleşmişse, embriyo gelişiminin ilk döneminde eksojen progesteron reçete ederek kadının vücudunu desteklemek çok önemlidir. Bu tür bir terapi, kürtaj tehdidi, spontan kürtaj gibi komplikasyon riskini azaltır. Tüp bebek protokolünü geçen kadınlar, yumurtalıkların delindiği günden itibaren progesteron preparatları almaya başlar. Terapi süresi tamamen bireyseldir.

Bununla birlikte, üreme alanındaki uzmanlar, hamileliğin en az 12. haftasına kadar gestajen almayı bırakmamanız gerektiğini ve endikasyonlar varsa klinik duruma göre dozu ayarlayarak bırakın.

Luteal fazı desteklemek için bu tür ilaçlar kullanılır. Utrozhestan gibi - mikronize progesteron, duphaston, lutein.

Çok tartışmalı bir konu, oral ve vajinal olabilen progesteronun veriliş yoludur. Bazı uzmanlar vajinaya kapsül sokma eğilimindedir, diğerleri kategorik olarak buna karşıdır. Ancak, ağızdan alındığında utrogestanın etkilerinin sistemik olduğu kesin olarak bilinmekte olup vajinal kullanım için söylenemez. Ve hamile bir kadın için progesteronun tüm organ ve dokularda bulunan tüm reseptörler üzerindeki etkisi çok önemlidir.

Yüksek dozda ilaçlar, özelliklerine neden olabilir. yan etkiler baş dönmesi, mide bulantısı, kusma şeklinde. Ancak arzu edilen hamileliği sürdürmek için kadınlar buna ve hatta daha fazlasına katlanmaya hazırdır.

Embriyo transferinden sonra kadınlar için davranış kuralları.

Embriyo implantasyon sürecinin mümkün olduğunca sorunsuz ve verimli çalışmasını sağlamak. Bir kadın, doktorunun onu bilgilendirmek zorunda olduğu belirli normlara uymalıdır:

• Embriyo transferinden sonraki ilk iki haftada bir kadının herhangi bir zihinsel ve fiziksel stresi dışlaması gerekir, sadece huzur, sadece olumlu duygular;
• Cinsel yaşam sorusu: İlk iki hafta soru dikkate bile alınmaz - seks yapmak kesinlikle yasaktır. Ayrıca ilgili hekim, klinik duruma bağlı olarak cinsel dinlenme süresini uzatır veya çifti bu konuda sınırlamaz. Herhangi bir fiziksel aktivite kendiliğinden düşük riskini artırabilir;
• Sporun da dışlanması gerekir;
• Oturma pozisyonunu sınırlayın. Daha fazla dinlenin ve olumlu duygular edinin;
• Sigara içmek, alkollü içki içmek kesinlikle yasaktır;
• Bulaşıcı hastalıkları olan hastalarla teması sınırlayın;
• Hamam ve saunalar da yasaktır.

Yeniden dikimden sonra başarısız eko belirtileri

Embriyo transferinin sonuç vermediği ve implantasyonun gerçekleşmediği durumlar vardır. Bu durum, işaretlerin ortaya çıkmasıyla karakterize edilir:

• Embriyo transferinden sonraki ilk günden itibaren adet kanamasının başlaması;
• Negatif gebelik testi;
• Laboratuvar tanısında elde edilen hCG seviyesi 50 IU / ml'nin altındadır;
• Sübjektif gebelik belirtilerinin olmaması, böyle bir varsayımı doğrulamak için bir kılavuz değildir.

Sonuç olarak embriyonun rahim boşluğuna transfer aşamasının tüp bebek protokolünün ana aşamalarından biri olduğu söylenmelidir. Teşhisiniz varsa ve doktorunuz tüp bebek prosedürüne gerçekten ihtiyacınız olduğuna dair bir sonuca varırsa, bunu ve temel IVF programının geri kalanını zorunlu sağlık sigortası pahasına ücretsiz olarak gerçekleştirebilirsiniz. sitede uygulama.

Ne yazık ki çocuk sahibi olamayan bir grup kadın var. Ama endişelenme, bir çıkış yolu var. AT son zamanlar doktorlar aktif olarak IVF gibi bir yön geliştiriyorlar, yani. Tüp bebek sırasında embriyo transferi uzun sürmez, ancak bir kadının genel önerileri bilmesi gerekir.

Eğitim

Embriyo transferine nasıl uygun şekilde hazırlanılacağını anlamaya değer. Bu döllenme yöntemi yapay olarak kabul edilir ve laboratuvarda yeni bir yaşamın doğuşunu temsil eder. Bu nedenle, bu tür bir döllenme sadece bir kadın için değil, bir erkek için de olabildiğince ciddiye alınmalıdır. Birkaç uzman tarafından muayene edilmesi gerekmektedir.

Önemli! Hamile kalma şansınızı artırmak için kurallara sıkı sıkıya uymanız gerekir. Aksi takdirde hem hamile kalma şansı azalacak hem de psiko-duygusal bir bozukluk ortaya çıkacaktır. gergin sistem, bu da bir dizi hastalığa yol açabilir.

1. kötü alışkanlıklardan vazgeçmek;
2. beslenmeyi izle. Yağlı ve baharatlı kahveyi diyetten çıkarın;
3. sıcak banyolardan kaçının ve fiziksel aktivite. Şehirde kötü bir şekilde koştuk, genel temizlikle uğraştık, kötü bir şekilde. Mümkünse, tüm fiziksel aktiviteyi hariç tutun;
4. doktora danışmadan ilaç almamalısınız;
5. tüp bebek sonrası 2-3 saat yatın.

Döllenme hangi gün gerçekleşir? Tedavi siklusun başlamasından 1-2 ay önce planlanır. Döllenmenin hangi gün gerçekleşeceğini doktor kesin olarak söyleyebilecektir.

Buna ek olarak, bir kadının embriyo transfer gününe mümkün olduğunca uyum sağlaması gerekir. Bu nedenle, kendinizi zihinsel olarak hazırlayın, bu çok önemlidir çünkü prosedür, embriyoları transfer etmeden önce rahmi mümkün olduğunca gevşetmenizi gerektirir. Bazı kadınlar embriyo transferi için yanlarında ne getireceklerini ve tüp bebek sonrası ne yapacaklarını bilemiyorlar. Yanınıza alın: bir havlu, gazsız su. Tüp bebek sonrası yapılması gerekenler sakin kalmak ve yukarıdaki tüm kurallara uymaktır.

Adamın hazırlığı. Erkeklerin belirli kurallara uyması gerekmektedir. Hastalık döneminde sperm bağışlamayın, bu materyali olumsuz etkiler. Viral hastalıklar sperm hareketliliğini etkiler ve bu da pozitif sonuç yüzdesini azaltır.

İkinci altın kural, sperm bağışından önceki 3 gün içinde cinsel ilişkiden kaçının, ilaç almayın, kötü alışkanlıklardan kurtulun ve beslenmeye dikkat edin. Her iki ortak da bu önerileri ciddiye alırsa, mutlu ebeveyn olma şansları vardır.

Prosedürün özü

21. yüzyılda tüp bebek giderek daha popüler bir prosedür haline geliyor ve birçok çiftin bebek sahibi olmak için son şanstan yararlanmalarına olanak tanıyor.

Embriyo transferi suni tohumlamanın en önemli aşamalarından biridir. Döllenmiş ve düzgün gelişen hücrelerin test tüpünden transferi, dişi yumurtaların delinmesi ve test tüpünde erkek spermi ile bağlantı kurmasından sonra öngörülür. Daha fazla implantasyon için, bebek taşımaya uygun olmayan zayıf ve gecikmeli embriyolar atılır.

Zaten anlaşıldığı gibi, doktorlar ayrıca canlı, hareketli spermlerle seminal sıvıyı da iletirler. Akabinde doğal veya kombine embriyo transferi gerçekleştirilir.

Büyüleyici bir bebek doğurmayı hayal eden bir kız için sonuç her zaman neşeli değildir. Rahimde meydana gelse bile, hamileliğin başlangıcını garanti etmek imkansızdır.

Başarı aşağıdaki faktörlere bağlıdır:

• döllenmiş zigotların bölünme sayısı;
• elde edilen hücrelerin kalitesi;
• kırma hızı;
• daha fazla gelişmede patolojilerin riskleri.

Yukarıdaki hususların tümü, sonraki faaliyetlerden önce bir uzman tarafından dikkate alınır.
Embriyo transferi ile ilgili her şeyi incelemek, olayın özelliklerini anlamaya değer.

Döllenmeden sonra zigot hatasızözel koşullara sahip bir test tüpüne yerleştirilir. Daha sonra deneyimli uzmanlar hücrelerin gelişimini gözlemler. İki günlük embriyolar kadının rahmine transfer edilir ve bazı durumlarda üç günlük embriyolar transfer edilir. Her şey kadının hormonal geçmişine ve hücrelerin durumuna bağlıdır. Bazen süre 5 güne kadar uzar. Her şey yolunda giderse, hamilelik daha da doğal gelişimi ile gerçekleşir.

Birçok hasta, doktorun giderek daha fazla bir embriyonun transferinde ısrar ettiğini belirtiyor. Kalan yumurtalar özel bir şekilde dondurulur, böylece gerekirse ekstra finansal maliyet olmadan ikinci kez tüp bebek yapılabilir. Bunun nedeni şu faktördür: Bir kadın gerginse veya uzmanların tavsiyelerine% 100 uymazsa, gebe kalmaz. İstatistikler şunu söylüyor: kızlar vakaların% 35-50'sinde hamile kalıyor ve çoğu mevcut hastalıklara bağlı.

1 embriyo transferinden (en yaygın seçenek) veya 2 embriyonun rahme transferinden önce kadın uyarılır. Bu nedenle rüyada ikiz bebek gören çiftler, riskleri anlayarak iki embriyo transfer etme hakkına sahiptir.

Birinci ve gerekirse ikinci embriyo transferi (8a) ve sonraki herhangi bir girişim, hücrelerin kalite açısından özel olarak test edilmesini sağlar. Yeniden dikme, yalnızca en güçlü hücrelerin kullanılmasını içerir. Son zamanlarda suni tohumlamada tüp bebek gelişimi en önemli faktörlerden biri olduğu için rahim implantasyonu 5. günde gerçekleştirilmektedir. Ancak aşama başarılı olursa, gebe kalmaya devam edilir.

Transfer prosedürü

Embriyo transferinin tüm kuralları, daha fazla gebe kalma olasılığını belirler. Hafif ve özellikle karmaşık vakalar, olumlu bir sonuç için hasta tarafından sorumlu bir yaklaşım gerektirir.

Doktorlar, herhangi bir zor embriyo transferinin, bir kadının tüm tavsiyelere uyması için özel bir tutum gerektirdiği konusunda ısrar ediyor. resmi istatistikler IVF'nin başarısı sadece uzmanların niteliklerine, hastaların sağlık durumuna değil, aynı zamanda tüm tavsiyeleri doğru bir şekilde uygulama isteğine de bağlıdır.

• Şansı artırmak için bir kadının 1-2 saat uzanması tavsiye edilir;
• embriyo transfer gününe ilişkin tavsiyeler, bebek için tehlikeli olabilecek herhangi bir fiziksel aktivitenin dışlanmasını sağlar;
• yakın temasların 2 hafta ertelenmesi tavsiye edilir - birkaç ay (kesin perhiz süresi bir doktora danışıldıktan sonra belirlenir);
• embriyo transfer tekniği, protokole zorunlu uyumu sağlar ve hormonal ilaçların alınmasından herhangi bir sapma istenmez;
• anne adayı iyi bir ruh halinde olmalı ve iyi şansa inanmalı, düzenli yürüyüşler yapmalı, doğru beslenmeli, kötü alışkanlıklardan vazgeçmelidir.

Embriyoların rahim boşluğuna transferi nasıl yapılır? Suni tohumlama prosedürü jinekolojik bir sandalyede gerçekleştirilir. Bu sırada doktor özel aynalar kullanarak kadının rahim ağzını ortaya çıkarır ve başka bir uzman ince plastik bir tüpe benzeyen bir kateterle embriyoları alır. İşlem bittikten sonra kateterin içeriği incelenir ve protokoldeki nakledilen hücre sayısı belirlenir.

Döllenme in vitro nasıl gerçekleşir:

1. ilk aşama yumurta ve seminal sıvının alınmasıdır;
2. ardından özel işleme. Örneğin, seminal sıvı, daha sonra en güçlü ve en iyi spermlerin kullanılması için yıkanır;
3. tüp bebek yumurta delinmesinden 4-6 saat sonra başlar. Hareketli spermatozoa, fallop tüplerinin ortamına yakın koşulların bulunduğu bir inkübatörde yumurtalarla karıştırılır. Döllenme birkaç saat sürer;
4. uzmanlar embriyoların gelişimini kontrol eder;
5. 2 - 5 gün sonra rahim içine yeniden ekim gerçekleşir. Döllenmemiş ve anormal yumurtalar kullanılmaz.

Eko ile işler nasıl gidiyor? Kullanılmayan hücreler daha sonra prosedürlerde kullanılmak üzere sıvı nitrojen içinde dondurulur. Bilimsel araştırmalar, dondurarak yapılan suni tohumlamanın yüksek düzeyde etkili olduğunu kanıtlamaktadır. Bununla birlikte, kriyo tekniğinin hala bir avantajı vardır: Bir kadının tekrar hormon eğitimi alması gerekmez.

Embriyo transferi ne kadar sürer? Tüp bebek prosedürü 15 dakikadan fazla sürmez. Ekim işlemi servikal kanaldan ultrason kontrolünde gerçekleştirilir. Aynı zamanda, kadınlara suni tohumlamanın özelliklerini incelemeleri, özünü anlamaları ve zihinsel, fizyolojik olarak bir bebek taşıyan gelecekteki anlayışa hazırlanmaları tavsiye edilir.

embriyo yaşamı

Embriyo transferinin mekanizması ve sırası, başlangıcından bu yana çok az değişti. Biyolojik dokularla şu ya da bu şekilde temas eden tüm malzemelerin mutlak sterilliği, iniş için odadaki en uygun sıcaklığın korunması ve doktorun hızlı eylemleri söylenmemiş kurallardır.

Prosedürün kendisi, genel anestezi kullanılmadan jinekolojik bir sandalyede gerçekleştirilir. Bazen yatıştırıcı ve antispazmodik bir ajan kullanılır - çoğunlukla papaverin.

Başlamadan önce bazen hasta vajinal tuzlu su ile yıkanır. Daha sonra kateterli steril paketler açılır. Genellikle 2 tane kullanılır - sert ve yumuşak. Sert olan servikal kanala sokularak rahim boşluğuna giden yol açılır ve embriyolar yumuşak bir şekilde hareket eder. Kateter seçimi ayrıca kadının zor transferlere yol açabilen spazm eğilimine de bağlıdır.

Daha sonra yumuşak bir katetere takılan özel bir şırınga ile az miktarda kültür medyumu ve az hacimde hava ile 3 günlük embriyolar alınır. Bundan hemen sonra embriyolog, doldurulmuş kateteri hastaya yerleştirmesi için üreme uzmanına verir. Şırınga pistonuna basan uzman, kateterin içeriğini uterusa iter. Ayrıca pistonu serbest bırakmadan her iki kateter de vajinadan çıkarılır ve kalan embriyoların varlığı için inceleme yapılır. Bu nadiren olur, vakaların% 1'inden fazla olmaz.

Tüm prosedür 40 dakikadan fazla sürmez. Ondan sonra kadın bir süre (20-30 dakika) hala sandalyede kalıyor, bundan sonra bazı kliniklerde hasta yatağında koğuşta yaklaşık bir saat uzanma fırsatı buluyor. Çok sayıda yeni araştırmaya göre, transfer sonrası uzun dinlenme ile başarısı arasındaki ilişki kurulmamıştır.

kadının davranışı

Embriyolar kadının vücuduna yerleştirildikten sonra embriyo transferinden sonra yapılması gerekenler doktor tarafından anlatılmaktadır. Bazıları motor aktivitenin dışlanması gerektiğini savunurken, diğerleri yaklaşık iki saat uzanmayı ve ardından hafif bir yürüyüş yapmayı tavsiye ediyor. Temel olarak hasta normal yaşam tarzına devam eder, ancak yine de belirli kısıtlamalar vardır.

Başarılı bir transfer olasılığını artırmak için doktor ilaç yazar, bu nedenle her gün ilaç alır ve ateşini ölçer. Bir migren varsa, doktor sitramonun yarısını reçete eder. Kendinizi fiziksel efordan korumaya değer, spor salonuna gitmeyin, aşırı ısınmayın ve üşümeyin, araba kullanmayın, temiz havada yürüdüğünüzden emin olun.

Bu dönem bir hastalık değil, bazıları öksürmekten bile korkuyor ama anne adayı oturabilir, gülebilirsiniz, beslenme dengeli olmalı. Doktor değiştirmeyi tavsiye ederse, bu yapılmalıdır. Doğal olarak, bir kadın hamilelikle ilgileniyorsa, tüp bebek embriyo transferi sonrası tavsiyelere uymalıdır.

Embriyo transferinden sonra yatak istirahati gerekli midir? Uzmanlar, embriyo transferinden sonraki ilk günü yatakta, duş veya banyo yapmadan geçirmenizi tavsiye ediyor. Seks yapılması tavsiye edilmez. Kabızlık varlığında müshil almak daha iyidir. Başarısız olarak IVF'den sonra bir moda ihtiyacınız var, uyku süresi en az 8 saat.

İmplantasyon sonrası kontrendikasyonlar. Embriyoların transferinden sonraki dönem sorumlu kabul edilir, hasta uzun zamandır beklenen hamileliğin gelmesini gerçekten istediğiniz için endişelenmeye ve gerginleşmeye başlar. Sahne aslında sorumludur, bu nedenle basit yatıştırıcı kaynatma kullanabilirsiniz. Hastanın rahmine yetersiz kan verilirse, ona Viagra reçete edilir. Bazı davranış kurallarına uyulur.

Böylece tüp bebek embriyo transferi sonrası davranışlar değişir. Çift, hCG testini geçmeden önce ciddi bir dönemden geçiyor, bu nedenle prosedürün başarı şansını artırmak için her şey yapılıyor. Uzmanların tüm talimatlarını dikkatlice yerine getirirseniz, sonuç olarak, doğumdan sonra harika bir bebek görünecektir.

hijyen

Embriyo transferi doktorlar ile hastaların tam onayı alınarak yapılır ve ekilecek embriyo sayısı belirlenir. Bu bağlamda, prosedür iki ebeveynin varlığını gerektirir.

Yürütme işlemi on dakika kadar sürer. Embriyolar rahim boşluğuna nakledilir. Anne adayı, yakında doğacak küçük canlının sorumluluğunun farkına varmalıdır. Öncelikle hijyenistlerin tavsiyelerine uymalıdır.

Embriyo transferinden sonra duş alabilir miyim?İşlemden sonra kadınlar önerilen hijyene uymalıdır. Bu nedenle duş almak yasak değildir, suyun ılık olması ve 37 C'yi geçmemesi önerilir. Ayrıca saçınızı boyayabilir, yıkayabilir ve banyo yapabilirsiniz. sauna ve jakuzi izin verilmedi.

Embriyo transferinden sonra ne zaman duş alabilirim?İlk gün prosedürü geçtikten sonra duş almamak daha iyidir, özellikle kendinizi yıkamamalısınız. Daha sonra ılık su ile durulayın.

Embriyoların tanıtılmasından sonra beslenmeye özel önem verilir. Proteinli yiyecekler yararlıdır. Yemek pişirmek için balık ve et ürünleri, sebze ve meyveler, süt ve süt ürünleri kullanılır. Doktor özel bir diyet oluşturursa, takip edilmesi ve alınması önerilen yiyeceklerle sınırlandırılması gerekir.

Embriyo transferinden sonra yapılmaması gerekenler nelerdir? Doktorlar evi temizlemeyi ve ağır şeyler kaldırmayı önermezler, çünkü eğilmek tavsiye edilmez, embriyo transferinden sonra sigara içmek kontrendikedir. olmak için daha az halka açık yerlerdeçünkü orada çok insan var. Sonuç olarak, bir enfeksiyon kapabilir ve hastalanabilirsiniz ve bu, zayıflamış bir kadın vücudu için komplikasyonlarla doludur.

Tüp bebek embriyo transferinden sonra çalışabilir miyim? Birçok kadın bu soruyu soruyor. Temelde embriyo transferi sonrası çalışan anneler işe gitmeleri gerektiğine ikna olmuş durumda, sürekli yatakta yatmalarına gerek yok.

Gıda

Embriyo transferinden önce yemek yiyebilir miyim? Evet. Ayrıca daha fazla sıvı tüketin. Embriyo transferinden önce daha sulu besinler yenmesi tavsiye edilir. Buna taze hazırlanmış et yemekleri, sebze ve meyve ürünleri dahildir. Doktorlar, embriyo transferinin yapıldığı gün ananas yemenin çok faydalı olduğuna dikkat çekiyor.

Planlanan prosedürden birkaç saat önce içilmesi tavsiye edilir. çok sayıda su.

Rahim boşluğuna embriyo transferinden sonra nasıl yenir? Günde iki litreye kadar daha fazla sıvı içilmesi tavsiye edilir, daha az değil. Kompostolar, taze sıkılmış meyve suları olabilir. Protein açısından zengin yiyecekler tercih edilmelidir. Her şeyden önce, dengelenmelidir. Diyet doğal ürünleri içerir.

tatlılar;

Transfer işleminden sonra kadın vücudu genellikle kabızlığa maruz kalır. Böyle bir durumu önlemek için diyette lif içeren ürünlerin (yulaf ezmesi, kepekli ekmek, çiğ sebzeler) miktarı artırılır, embriyo transferinden sonra ananas da yenmesi önerilir.

Kesirli öğünlere geçmek mümkündür: sık sık ve küçük porsiyonlarda. Embriyo transferinden sonra yemek doğru olmalı ve mümkün olduğunca sağlıklı bir yaşam tarzına öncülük etmelidir.

Tüp bebek sırasında rahim boşluğuna embriyo transferi protokolün son ve en heyecan verici aşamasıdır. Ortalama olarak vakaların %35-40'ında işlem başarıyla sonuçlanmaktadır. Bir kadın bu mutlu yüzdeye girip girmediğini ancak 10 gün sonra öğrenebilecek. Tüm bu süre boyunca, vücudu embriyo ile bir "diyalog" yürütecek ve bunun sonucunda ya uterus endometriyumuna başarılı bir şekilde implante edilecek ya da bir sonraki adet sırasında kanla çıkmaya zorlanacaktır.

Doğal gebelikte bile, döllenmiş yumurtaların reddi, bir kadının tahmin edebileceğinden çok daha sık gerçekleşir. Kesinlikle sağlıklı genç bir çift tarafından tasarlanan embriyoların önemli bir kısmı genetik olarak kusurludur - rahim onlara yaşama şansı vermez ve onları reddeder. Doğal koşullarda gebeliklerin sadece %30'u gebelikle sonuçlanıyor ve bu açıdan bakıldığında tüp bebek etkinliği artık o kadar da düşük görünmüyor.

Bir kadın kendi kendine hamile kalamazsa, yumurtalıklarından bir yumurta alınır ve bir laboratuvarda kocasının spermiyle birleştirilir. Bu tüp bebek tedavisidir. Ancak her iki eşin de genetik materyalinin gebe kalmaya uygun olmadığı da olur. Bu durumda doktorlar, sorunu kökten çözmeyi ve başka birinin yumurtasının başka birinin spermiyle füzyonu sonucu elde edilen tüp bebek için donör embriyo kullanmayı önermektedir. Daha sonra aynı şekilde rahme transfer edilir.

Tüp bebek embriyo transfer prosedürü hızlı ve ağrısızdır. Döllenmiş yumurtanın olması gereken yere nakledilmesi için ince bir plastik kılavuz kullanılarak rahim içine ilerletilen bir kateter kullanılır. Doktor, tüm eylemlerini ultrason makinesinin monitöründe kontrol eder. Kateter hedefe ulaştığında, içinde embriyonun bulunduğu bir damla besleyici ortam salınır. Manipülasyonlar birkaç dakika sürer ve bir saat sonra kadının hastanede olması önerilir.

Bu konudaki en önemli şey, yeniden dikim için doğru zamanı seçmektir. Bu sözde implantasyon penceresidir ve prosedürün başarısı büyük ölçüde doğru belirlenip belirlenmediğine bağlıdır. Gerçek şu ki, hem annenin vücudunda hem de embriyoda yeniden dikim sırasında, onların bağlantı kurmasını sağlayacak karmaşık biyokimyasal süreçlerin gerçekleşmesi gerekir.

Bunun için, embriyonun dış kabuğu olan trofoblast hücreleri, endometriyuma "yapıştığı" özel enzimleri sentezler. Aynı şey uterus astarının hücrelerinde de olur, ayrıca embriyonun implante olmasına yardımcı olan özel maddeler - sitokinler ve kemokinler salgılarlar. Yani, kadının vücudu ile fetüs arasında, sonucu dışarıdan etkilenmesi zor olan karmaşık bir etkileşim gerçekleşir.

Endometriyumun bir yumurtayı kabul etmeye hazır olmasına alıcılık denir. Yani, implantasyon penceresi uterusun alıcı olduğu kısa bir süredir. Bu dönem, doğal yumurtlama veya yapay yumurta alımından sonraki 6-8 gün içinde gerçekleşir.

Embriyonun gelişiminin hangi aşamasında kök salması en olasıdır?

Doğada her şey en ince ayrıntısına kadar düşünülür. Doğal gebelikte, implantasyon penceresi tam da yumurtanın en uygun olduğu zamanda açılır - bu süreçler düzenlenir hormonal arka plan kadın. IVF'de doktorlar, progesteron içeren ilaçları reçete ederek kasten endometriyumu uyarabilirler. Sadece mukoza tabakasının alıcılığını arttırmakla kalmaz, aynı zamanda başarılı implantasyon için çok önemli olan uterusu rahatlatırlar.

Tüp bebek prosedürünün her zaman standart adımları olmasına rağmen bazı teknolojiler farklı kliniklerde farklılık gösterebilmektedir. Her şeyden önce bu, tüp bebek sırasında embriyonun implante edildiği günle ilgilidir. Üreme teknolojisinin şafağında, yumurta suni tohumlamadan sonraki ikinci veya üçüncü günde rahme aktarılıyordu. Bazı durumlarda bunu şimdi bile yaparlar çünkü anne rahmi embriyonun gelişimi için en iyi ortamdır. Ancak öte yandan, uygulanabilirliğini bu kadar erken bir tarihte tahmin etmek imkansız. Laboratuvarda yumurtaları gözlemlemeye devam ederseniz, yaşamın beşinci gününde tam teşekküllü sağlıklı embriyolardan bazılarının aniden gelişmeyi durduracağı, diğerlerinin ise tam tersine daha hızlı ve daha iyi büyümeye başlayacağı ortaya çıktı. önceki. Bu nedenle, tüp bebek sırasında embriyo transferinin hangi gün için en uygun olduğu sorusuna kesin olarak cevap vermek zordur.

İniş zamanı seçimi

Aşağıdaki verileri verir:

• bir günlük embriyoları yerleştirirken, vakaların% 17-18'inde gebelik meydana geldi;
• üç gün - %38-41'de;
• beş gün -% 43-48'de.

Görünüşe göre sonuç açık: embriyo transferinin beşinci güne kadar ertelenmesi tavsiye edilir, ancak her şey o kadar basit değil. Yumurtalar laboratuvarda 3 günden fazla bırakılırsa gelişimleri durabilir. Yani, transfer edilecek hiçbir şeyin olmayacağına dair gerçek bir risk var. Ve eğer nakil hala üçüncü günde gerçekleştiyse, hamilelik şansı harika olurdu -% 41'e kadar.

Durum iki yönlüdür. Bu nedenle, doktorlar genellikle her bir vakanın koşullarını dikkate alarak farklı davranırlar. Tüp bebek sırasında nakil için genel kabul görmüş kurallar şunlardır:

• 5'ten az embriyo elde edildiyse üçüncü gün rahme transfer edilmelidir;
• suni tohumlamadan üç gün sonra 5'ten fazla embriyo hala canlıysa, transfer, rahimde tutunma şanslarının daha yüksek olacağı 5. güne kadar ertelenebilir.

Alternatif bir seçenek de var - çift yeniden dikim. Yumurtaların bir kısmı üçüncü günde, kalanı ise beşinci günde transfer edilir. Böylece, bir taşla iki kuş vurmak mümkündür - embriyolara gelişme için en uygun koşulları sağlamak ve ardından güvenli bir şekilde oynamak ve ilk kuşların yaşamaması durumunda birkaç tane daha yerleştirmek mümkündür.

Ancak bu seçeneğin bir dezavantajı da vardır - çoğul gebelik riski ve sonuç olarak meyve vermeme çok yüksektir. Bu durumda, zaten yerleşik olan embriyoların azaltılması (fazla olanların çıkarılması) gerekli olabilir ve bu da güvenli değildir. Konunun ahlaki ve etik boyutunu bir kenara bıraksak bile, yüksek bir düşük yapma riski devam etmektedir. Bu nedenle, hamilelik şansını artırmaya çalışmak, tüm tüp bebek prosedürünü tehlikeye atabilir.

Tek bir sonuç var: Embriyo transferi için en uygun zaman her durumda bireyseldir. Genetik materyalin miktarı ve kalitesi ile kadının fizyolojik durumuna bağlı olarak sadece bir doktor böyle bir karar verebilir.

Embriyo nakli hangi durumlarda tüp bebek sırasında iptal edilir?

İmplantasyonun başarılı olması için iki bileşenin varlığı önemlidir:

1. kaliteli yumurta;
2. alıcı endometriyum, onu almaya hazır.

Bu koşullardan en az biri karşılanmazsa veya yeterince gözetilmezse transfer bir anlam ifade etmez. Endometriyum ile ilgili sorunlar olması durumunda, ancak elinizde zaten yüksek kaliteli genetik materyal varsa, dondurulabilir. Yani, prosedüre tabidir. Transfer, rahim hazır olana ve implantasyon penceresi açılana kadar ertelenecektir.

En çok yaygın sebepler Embriyo nakli tarihinin iptal edildiği veya ertelendiği:

1. , bir delikte 20 veya daha fazla yumurta toplama yeteneği ile kanıtlanır. Ek olarak, kadının refahında bir bozulma da eşlik eder - nefes darlığı, uzuvlarda şişlik görülür ve karın büyüklüğü önemli ölçüde artar.
2. Endometriyumun hiperplazisi, yani artışı. Normalde, alıcı endometriyumun kalınlığı 9 ila 12 mm arasında değişebilir. Ultrason, uterusun mukoza tabakasının hacminin 14 mm veya daha fazla arttığını gösteriyorsa, yeniden dikim yapmak anlamsızdır - döllenmiş yumurta böyle bir endometriyumda bir yer edinemeyecektir. Tedavi edici veya cerrahi bir yöntemle sorun çözülebilir ve embriyolar daha iyi zamanlara kadar dondurulabilir.
3. Bir kadının kanında yüksek progesteron seviyeleri. Bu hormonun miktarına göre, implantasyon penceresinin durumu yargılanabilir. Analiz 10-20 nmol/l'nin üzerinde değerler gösteriyorsa, bu pencerenin uzun süredir açık olduğu ve embriyoların yerleşmek için zamanları olmayabileceği anlamına gelir. Bu açıdan progesteron seviyesinin düşük olması tercih edilir - doktor dışarıdan hormonal stimülasyon reçete ederek, gerektiğinde pencereyi kendi başına açabilir.
4. Eşlik eden hastalıklar - SARS, grip, yaralanmalar.

Ancak doktorun embriyo transferini herhangi bir nedenle erteleyerek kadının gebelik şansını azalttığı düşünülmemelidir. İşlerin tam tersi olduğu ortaya çıktı. Son zamanlarda, İtalyan bilim adamları donmuş döllenmiş yumurta kullanan gebelik yüzdesinin taze protokollere göre daha yüksek olduğu sonucuna varmışlardır. Ve tam tersine, düşüklerin yüzdesi daha düşüktür. Bu gerçek şu sonuca varmamızı sağlar: yapay olarak implantasyon için koşullar yaratmaya çalışmak ve bir pencere açmaya çalışmak yerine hormonal ilaçlar, doğal döngüde uygun koşulları beklemek daha iyidir.

Embriyo neden tüp bebek sırasında implante edilmez?

Üreme uzmanları yüksek kaliteli genetik materyalle çalışsalar ve yeterli sayıda canlı embriyo elde etmeyi başarsalar ve ardından açık implantasyon penceresi döneminde bir transfer planlasalar bile, hamileliğin başlangıcı hakkında konuşmak için henüz çok erken.

Büyük önem taşıyan doğal doğal seçilim faktörüdür. Rahim astarı, doktorların göremediği genetik hataları tanıyabilir. Kusurlu bir embriyo rahme girer ve implante etmeyi başarırsa, endometriyum er ya da geç patolojiyi görecek ve böyle bir embriyoyu beslemeyi bırakacaktır. besinler. Böylece doğa kadını hayal kırıklığına uğramaktan korur ve hamilelik başlar başlamaz kesintiye uğrar.

Elbette bu konuda her şey sadece embriyonun kalitesine bağlı değil. İmplantasyona müdahale eden başka durumlar da vardır. Aralarında:

• hiperplazi (endometriyumun kalınlaşması);
• inceltilmiş endometriyum (7 mm'den az kalınlık);
• polipler;
• kalıtsal veya edinilmiş trombofili;
• obezite;
• yaş;
• immünolojik bozukluklar.

Yakın zamana kadar, 45 yıl sonra kısırlığın nedeninin üreme materyalinin kalitesizliğinde yattığına inanılıyordu. Ancak önemli olanın sadece oositler değil, aynı zamanda rahmin iç astarı olduğu pratik olarak kanıtlanmıştır - yaşla birlikte, alıcı yetenekleri önemli ölçüde azalır.

Yumurtlama uyarımı implantasyonu nasıl etkiler?

Üreme uzmanları, tüp bebek sırasında embriyo neden tutunmaz sorusunun cevabının, bir gün önce yapılan yumurtlamanın yapay olarak uyarılmasında olabileceğinden şüpheleniyorlar. Bunun endometriyumun yapısını nasıl değiştirdiği hala kesin olarak bilinmiyor. Hücreleri histoloji için almak ve embriyo transferinden önce incelemek imkansızdır - mukozanın bütünlüğünü ihlal ederek, tüm çabaları geçersiz kılmak kolaydır.

Durum şu: Endometriyum ile ilgili olası bir sorundan şüpheleniliyor, ancak bunu doğrulamak veya çürütmek için materyal alamıyorlar. Bu nedenle COS'un (kontrollü yumurtalık uyarımı) etkisi henüz kanıtlanmamıştır. Kesin olarak bilinen şey, implantasyon penceresini değiştirebilen erken progesteron salınımı olasılığıdır.

Tüp bebek ile gebelik şansı nasıl artırılır: 5 ana kural

1. Döllenmiş hücrelerin laboratuvarda kültivasyonunu 5 güne kadar uzatın ve embriyoların kalitesini doğrulamayı ve sayısal kromozom setini değerlendirmeyi mümkün kılacak implantasyon öncesi teşhislerini gerçekleştirin.
2. Çoğul gebelik riskini en aza indirmek için transfer için en iyi tek embriyoyu seçin.
3. Embriyoları rahme transfer etmek için sadece genetik materyale zarar vermeyen yumuşak, toksik olmayan kateterler kullanın.
4. İmplantasyon penceresinin açılmasını kaçırmamak için kadının kanındaki progesteron seviyesini dikkatlice izleyin.
5. Düşük molekül ağırlıklı heparin formlarını kullanarak tromboz oluşumunu önlemek için. Aynı ilaç, embriyoyu saran ve besleyen mikrodamarlardaki kan dolaşımını iyileştirir. Heparin ile tedavi özellikle yumurtalık hiperstimülasyonu semptomları ve kan pıhtılaşmasında artış olan hastalar için önemlidir.

Bazı klinikler embriyonun yumurtadan çıkmasına yardımcı olmak için başka bir yol kullanır. Bu teknik, döllenmiş yumurtayı koruyan dış zarın kesilmesini içerir. Dış kabuğun bariz anormalliklerinin varlığına ek olarak, kuluçka endikasyonları aşağıdaki durumlardır:

• 35 yaşından büyük kadının yaşı;
• birkaçının deneyimi;
• dondurularak saklanan embriyoların transferi;
• yüksek kan seviyeleri.

Hastanın kendisi, doktorun talimatlarını dikkatlice takip ederse embriyonun implante olmasına yardımcı olabilir. Yumurta transferinden sonraki ilk 10 gün en kritik dönemdir. Şu anda, bir kadın ağırlık kaldırmamalı, sıcak duş, vajinal seks, hipotermi ve aşırı yüklenme ile meşgul olun. Aktif sosyal temasları ve fiziksel aktiviteyi sınırlamak mantıklıdır, ancak elbette aşırıya kaçmamalı ve 10 gün boyunca kanepede yatmamalısınız.

İspanyol üreme uzmanları tarafından yürütülen son araştırmalar, rahmin en uygun pozisyonda olduğu her gün yavaş yürüyerek implantasyon şansını artırabileceğinizi kanıtladı. Ayrıca telaşsız hareketler kan dolaşımını iyileştirir ve duygusal stresi azaltmaya yardımcı olur.

Çabaların başarı ile taçlandırıldığını ve embriyonun rahme sağlam bir şekilde yerleştiğini dolaylı belirtilerden anlamak mümkündür:

• hafif sabah bulantısı;
• ağızda metalik bir tat görünümü;
• subfebril sıcaklıkta artış;
• alt karın bölgesinde bazen hafif kahverengi akıntının eşlik ettiği hafif çekme ağrıları;
• meme bezlerinin artan hassasiyeti.

Bu belirtilerin tümü bir arada bulunabilir veya hiç görünmeyebilir. Rahimde embriyo olduğunu öğrenmenin tek yolu hCG düzeyi testi yapmaktır. Analizlerin sonuçlarına dayalı sonuçlar, yeniden ekimden sonraki 12. günde yapılabilir.