PCR pregled. Što se može utvrditi pomoću PCR testa krvi i kako donirati

PCR razmaz u dijagnostici zaraznih bolesti ima sljedeće prednosti:

• Izravno otkrivanje uzročnika zaraznih bolesti.

Puno tradicionalne metode laboratorijska dijagnostika uključuje identifikaciju patogena različitim neizravnim znakovima. Na primjer, ELISA dijagnostika temelji se na otkrivanju proteina u krvi pacijenta, koji su produkti raspadanja zaraznih uzročnika, na temelju kojih liječnik može postaviti određenu dijagnozu. Metoda PCR analize daje izravnu indikaciju prisutnosti u materijalu uzetom od pacijenta određene regije DNA uzročnika bolesti.

• Visoka specifičnost PCR dijagnostike.

Tijekom analize u ispitivanom materijalu izdvaja se određeni fragment DNA, tj. svojstven samo određenom patogenu - samo određenoj bakteriji ili virusu. Ovaj dio DNK je jedinstven i nije karakterističan ni za jednu infekciju na zemlji.

• PCR visoke osjetljivosti.

Detekcija infekcije moguća je i ako materijal uzet od bolesnika sadrži samo jednu stanicu bakterije ili virusa. U usporedbi s drugim imunološkim i mikrobiološkim dijagnostičkim metodama: osjetljivost PCR analize je 10-100 stanica po uzorku, druge metode - 103-105 stanica.

0 Niz ( => Analize) Niz ( => 2) Niz ( =>.html) 2

• Svestranost PCR analize.

Za PCR istraživanje mogu se koristiti gotovo svi materijali, uključujući i one koji nisu dostupni za istraživanje drugim metodama: sluz, urin, krv, serum, sputum, ejakulat, struganje epitelnih stanica - budući da infekcija može biti sadržana u bilo kojim biološkim izlučevinama i tkiva.

• Velika brzina dobivanja rezultata PCR analize.

Jedinstvena metoda obrade materijala uzetog za analizu od pacijenta, detekcija produkata reakcije, automatizirana PCR amplifikacija omogućuju provedbu kompletne PCR dijagnoze za 4-5 sati. Istodobno, mnogo više vremena troši se na metode istraživanja kulture - od nekoliko dana do nekoliko tjedana, budući da je potrebno izolirati, a zatim uzgajati patogen u kulturi stanica.

• Sposobnost dijagnosticiranja bilo koje vrste infekcije.

Visoka osjetljivost PCR metoda omogućuje dijagnosticiranje infekcije ne samo na akutni stadij bolesti, ali i kronične infekcije, pa čak i prisutnost pojedinačnih bakterija ili virusa.

Razmaz pomoću PCR-a omogućuje vam identificiranje infekcija koje se ne mogu otkriti u razmazu za floru: klamidija, ureaplazmoza, mikoplazmoza, genitalni herpes.

Koliko god metoda istraživanja bila značajna, PCR dijagnostika ima i neka ograničenja. Nedostaci PCR dijagnostike uključuju:

• Mogućnost dobivanja lažno pozitivnog rezultata

PCR analiza može pokazati pozitivan rezultatčak i ako je infekcija već mrtva, "ubijena" antibioticima, ali su njezine mrtve stanice još uvijek sadržane u tkivima pacijenta. Kako je ovo moguće? Jako jednostavno. Na primjer, infekcija živi u epitelnim stanicama (na sluznici genitalija ili očiju). I izliječena je. Ali potrebno je vrijeme da se "obnove" epitelne stanice. Ako materijal uzima liječnik prije razdoblja potpune stanične obnove, materijal može sadržavati mrtve stanice infekcije. Stanice očito sadrže genetski materijal - DNA ili RNA patogena, koji "traži" PCR. PCR ne razlikuje mrtve stanice od živih: on traži DNK i "klonira" ih u velikim količinama. Rezultat ove analize je pozitivan. Zapravo, to je lažno pozitivno.

Nemogućnost PCR-a da "razlikuje" mrtvu infekciju od žive nameće određene zahtjeve pri korištenju PCR-a i praćenju učinkovitosti liječenja. Glavno pravilo je, naravno, pričekati dok se mrtvi ostaci infekcije potpuno ne eliminiraju iz tijela, što se kod prosječne osobe događa unutar 4-8 tjedana. Nakon tog razdoblja, nakon uzimanja posljednje tablete antibiotika, PCR metodom se može i treba pratiti učinkovitost liječenja.

gastroenterologija dijagnostički kompleks - 5 360 rubalja

SAMO U MARTEuštedite - 15%

1000 rubalja EKG snimanje s interpretacijom

- 25%primarni
Posjet liječniku
vikend terapeut

980 rub. prvi pregled hirudoterapeuta

termin terapeuta - 1130 rubalja (umjesto 1500 rubalja) "Samo u ožujku, subotom i nedjeljom, termin kod liječnika opće prakse s popustom od 25% - 1130 rubalja, umjesto 1500 rubalja (dijagnostički postupci se plaćaju prema cjeniku)

Za više rani datumi kontrola izlječenja može se obaviti samo metodom kulture, odnosno sjetvom: samo živi mikroorganizmi koji se razmnožavaju mogu poslužiti kao znak neizlječivosti.

• Neželjeno je koristiti PCR analizu za dijagnozu gardnereleze, jer gardnerela, uzročnici ove bolesti, normalno žive u vagini u maloj količini. DNK ovih bakterija, kada se koristi PCR, nalazit će se uvijek iznova. Gardnerella ne bi trebala biti u razmazu, a bakterioskopija je u ovom slučaju dovoljna metoda za dijagnosticiranje gardnereloze i praćenje liječenja.
• Varijabilnost mikroorganizama

Svaki mikrob ima sposobnost promjene, i to na razini DNK. Najupečatljiviji primjer u ovom području je virus gripe. Nakon što je jednom bila bolesna, osoba razvija antitijela na virus. Čisto teoretski, ako smo barem jednom preboljeli gripu, onda se, kao ni vodene kozice, ne bismo trebali razboljeti drugi put. Ali mi se razbolimo gotovo svake godine. Koji je razlog? Virus "mutira", pomalo "mijenjajući" svoj genom, a naš imunološki sustav, naša antitijela više ne "prepoznaju" starog gosta u novom ruhu. Nažalost, opet se morate razboljeti od gripe ...

Pri izradi pojačivača (testnog PCR sustava) koristi se fragment DNA specifičan za određeni mikroorganizam koji je najmanje podložan promjenama. On je "odabran" iz takozvane visoko očuvane regije DNK. Ali varijabilnost mikroorganizama može dovesti do činjenice da neki genotipovi ili sojevi patogena koji se proučavaju mogu steći mutacije u umnoženoj (kloniranoj) regiji genoma i tako postati nedostižni ovom sustavu ispitivanja.

Stoga su različiti test sustavi jedan od razloga zašto analize napravljene u različitim laboratorijima i različitim klinikama „istom“ PCR metodom mogu pokazati dijametralno suprotne rezultate. Kako bi se što je više moguće izbjegle pogreške mutacije, sada su razvijeni standardi koji reguliraju opseg testiranja (uključujući testiranje na unakrsne reakcije, kao i testiranje poznatih sojeva detektabilnog patogena) koje ispitni sustav mora proći prije nego što izlazi na tržište i koristi se za dijagnosticiranje vašeg zdravlja. Zato dobre klinike i laboratoriji koriste najnoviju generaciju testova. A naš medicinski centar "Euromedprestige" jedan je od rijetkih koji svojim klijentima može ponuditi visokokvalitetnu dijagnostiku.

U suvremenoj medicini PCR analiza tjelesnih tekućina vrlo je precizna i informativna. Uz pomoć ove analize otkriva se prisutnost virusnih i mikrobnih čestica u tijelu, čak i ako su bolesti skrivene i ne daju nikakve simptome.

Što za vas znači imenovanje PCR analize? Ova kratica označava metodu lančane reakcije polimerazom. poseban način provođenje laboratorijskih istraživanja. Ovom metodom biološki materijal dobiven od pacijenta stavlja se u poseban aparat. Skup reagensa enzima dodaje se mediju koji se proučava, koji pomaže u reprodukciji genetskog materijala patogena (virusa ili mikroba). Kad se reakcija reproducira veliki broj kopije DNA ili RNA, što omogućuje identifikaciju i virusnih i mikrobnih infekcija usporedbom s bazom podataka.

Što znači rezultat PCR analize? Ako u ljudskom tijelu postoji uzročnik bilo koje infekcije, čak i skrivene, ova analiza će otkriti ne samo njegovu prisutnost, već i koliko je ta infekcija prisutna u tijelu.

Za analizu infekcija pomoću PCR-a možete pregledati sve biološke tekućine u tijelu - krv, urin, slinu, genitalni sekret, sluz grla i nosa. Za analizu je potrebno vrlo malo materijala, jer ako su patogeni prisutni, zbog reprodukcije njihovih kopija, koncentracija genetske informacije dovesti do takve mjere da će otkriti mikrob ili virus i odrediti njegovu vrstu. Točnost PCR analize je vrlo visoka, danas se uz pomoć ove analize mogu utvrditi gotovo sve raširene virusne, mikrobne i druge infekcije.

No, što PCR analiza najčešće otkriva? Na popisu infekcija koje se mogu otkriti ovom metodom nalaze se zarazne, uključujući i društveno opasne infekcije poput tuberkuloze ili hepatitisa B i C. Istom metodom može se otkriti infekcija HIV-om, infekcija klamidijom i ureaplazmom, mikoplazmoza dišnog sustava i spolnih organa. Uz pomoć ove analize otkrivaju se drozd, bakterijska vaginoza, trihomonijaza. Mogućnosti ovu metodu omogućuju vam prepoznavanje skrivenih infekcija - herpes raznih vrsta, HPV (papiloma virus), kao i prepoznavanje posebnog mikroba odgovornog za razvoj čira na želucu - helikobatera.

Danas PCR test možete napraviti u gotovo svakom privatnom ili javnom laboratoriju. Ove vrste testova provode se za sve, djecu i odrasle. Ovisno o svrsi analize, ovisno o spolu, radi se analiza različitog biološkog materijala.

Dakle, PCR analiza kod muškaraca provodi se krvlju ili urinom, uretralnim sekretom, sluzi iz ždrijela ili nosa, sokom prostate ili čak spermom. PCR analiza kod žena moguća je u krvi i urinu, vaginalnom sekretu, sekretu iz uretre, sluzi iz nosa i ždrijela.

Vrlo često se PCR analiza koristi tijekom trudnoće, uz pomoć koje se otkrivaju skrivene infekcije u vaginalnom sekretu ili krvi, što zahtijeva posebno praćenje u tom razdoblju, a ponekad i odgovarajuće liječenje.

PCR kako uzeti analizu

Analizu za infekciju ovom metodom propisuje liječnik, često se prikupljanje materijala provodi odmah u ordinaciji liječnika - urologa ili ginekologa. Kako se radi PCR analiza?

Ispitni materijal se miješa s reagensima u laboratoriju i čeka se reakcija. U prisutnosti patogena, kopije njihove DNA ili RNA se umnožavaju. Aparat uspoređuje identificirane fragmente genetskog materijala s bazama podataka i točno identificira uzročnika infekcije. Po potrebi se naznači i količina uzročnika u određenim tjelesnim tekućinama. Obično studija traje ne više od 1-2 dana, ako je potrebno, provode se ekspresni testovi.

Odakle se uzima PCR analiza? To će ovisiti o tome koje se vrste patogena očekuju. Ako se radi o HIV-u ili hepatitisu, uzima se krv, ako se radi o spolnim infekcijama, uzima se bris iz uretre ili rodnice. Ako se sumnja na mononukleozu ili herpes, uzima se bris iz grla. Može se koristiti i urin, likvor, iscjedak iz rana, ispljuvak itd.

PCR test krvi

Za točne rezultate i dijagnosticiranje infekcija važno je davati krv ujutro na prazan želudac. PCR test krvi može identificirati patogene opasne bolesti- HIV, hepatitis, sifilis. U razdobljima pogoršanja i aktivnosti virusa u krvi mogu se otkriti herpes virusi, papilomavirusi i neki drugi.

PCR analiza: priprema

Za apsolutnu točnost analize važna je pravilna priprema za nju. Najlakši način da se pripremite za analizu krvi, nema ograničenja u prehrani ili aktivnosti, morate dati krv ujutro, na prazan želudac. Urin se uzima nakon pranja spolovila, iz srednjeg dijela u posebnu sterilnu posudu. PCR analiza iz genitalnog trakta zaslužuje posebnu pozornost, stoga je važno znati kako se pripremiti. Dan prije pregleda zabranjen je spolni odnos, preporuča se ne mokriti prije pregleda. Kod menstruacije kod žena, datum analize se odgađa za 3-5 dana od trenutka posljednjeg pražnjenja.

Koliko dugo traje PCR analiza

Analiza se, ovisno o mogućnostima laboratorija, može pripremati od nekoliko sati do nekoliko dana. U prosjeku, koliko dana se radi PCR analiza? Obično je to jedan ili dva dana. U hitnim slučajevima analiza se može obaviti isti dan, nakon nekoliko sati.

Nedavno je pouzdan, vrlo osjetljiv i brza metoda dijagnoza raznih ljudskih zaraznih bolesti. Ova metoda se naziva "PCR analiza". Što je to, koja je njegova bit, koje mikroorganizme može otkriti i kako ga pravilno uzeti, reći ćemo u našem članku.

Povijest otkrića

Također, PCR metode se koriste u dijagnostici raka.

Prednosti metode

PCR dijagnostika ima nekoliko prednosti:

1. Visoka osjetljivost. Čak iu prisutnosti samo nekoliko molekula DNA mikroorganizma, PCR analiza utvrđuje prisutnost infekcije. Metoda će pomoći kod kroničnih i latentnih bolesti. Često je u takvim slučajevima mikroorganizam inače nekultiviran.
2. Bilo koji materijal je prikladan za istraživanje, na primjer, slina, krv, genitalni sekret, kosa, epitelne stanice. Najčešći je krvni test i urogenitalni bris za PCR.

   

3. Dugotrajno uzgajanje usjeva nije potrebno. Automatizirani dijagnostički proces omogućuje vam da dobijete rezultate studije nakon 4-5 sati.
4. Metoda je gotovo 100% pouzdana. Zabilježeni su samo izolirani slučajevi lažno negativnih rezultata.
5. Mogućnost identifikacije nekoliko vrsta patogena iz jednog uzorka materijala. To ne samo da ubrzava proces dijagnosticiranja bolesti, već i značajno smanjuje materijalne troškove. Često liječnik propisuje složena analiza PCR. Cijena pregleda, koja se sastoji od određivanja šest patogena, iznosi oko 1500 rubalja.

Kako bi rezultati bili pouzdani tijekom PCR studije, potrebno je proći analizu, slijedeći preporuke za prethodna priprema na dijagnostiku:

1. Prije doniranja sline, trebate se suzdržati od jela i uzimanja lijekova 4 sata prije uzimanja materijala. Neposredno prije postupka isperite usta prokuhanom vodom.
2. Gornja pravila treba se pridržavati i prilikom uzimanja uzorka s unutarnje površine obraza. Nakon ispiranja preporuča se lagana masaža kože kako bi se istaknula tajna žlijezde.
3. Urin se obično prikuplja kod kuće. Da biste to učinili, morate provesti temeljitu toaletu genitalija. Sakupite 50-60 ml urina u sterilnu plastičnu posudu. Kako bi se osigurala čistoća materijala, ženama se preporuča staviti tampon u rodnicu, a muškarcima povući kožni nabor što je više moguće. Ne možete uzimati materijal tijekom menstruacije.
4. Da biste donirali spermu, morate se suzdržati od spolnog odnosa 3 dana prije prikupljanja materijala. Liječnici također savjetuju odlazak u saunu i uzimanje topla kupka pijenje alkohola i začinjene hrane. 3 sata prije analize morate se suzdržati od mokrenja.
5. Za porođaj, na primjer, ako se radi PCR test na klamidiju, i ženama i muškarcima preporučuje se seksualni mir 3 dana. Antibakterijski lijekovi ne smiju se uzimati 2 tjedna prije analize. Tjedan dana morate prestati koristiti intimne gelove, masti, vaginalne čepiće, ispiranje. 3 sata prije pregleda morate se suzdržati od mokrenja. Tijekom menstruacije uzorkovanje materijala se ne provodi, samo 3 dana nakon prestanka krvarenja možete uzeti urogenitalni bris.

PCR tijekom trudnoće

Dok čekate bebu, mnoge spolno prenosive infekcije izuzetno su opasne za normalan razvoj fetusa. STD mogu izazvati intrauterini zastoj u rastu, pobačaj ili prerano rođenje, kongenitalne malformacije djeteta. Stoga je iznimno važno podvrgnuti se PCR pregledu u ranoj trudnoći. Potrebno je proći analizu prilikom registracije - do 12 tjedana.



Materijal se uzima iz cervikalnog kanala posebnom četkicom. Postupak je bezbolan i ne predstavlja opasnost za bebu. Obično se tijekom trudnoće provodi analiza na klamidiju metodom PCR, kao i na ureaplazmozu, mikoplazmozu, citomegalovirus, herpes, papiloma virus. Takav kompleks ispitivanja naziva se PCR-6.

PCR za dijagnostiku HIV-a

Zbog činjenice da je metoda vrlo osjetljiva na promjene u tijelu i uvjete dijagnoze, mnogi čimbenici mogu utjecati na rezultat. Stoga PCR analiza za HIV infekciju nije pouzdana metoda, njegova učinkovitost je 96-98%. U preostalih 2-4% slučajeva test daje lažno pozitivne rezultate.

Ali u nekim situacijama ne može se bez PCR dijagnostike HIV-a. Obično se daje osobama s lažno negativnim ELISA rezultatom. Takvi pokazatelji pokazuju da osoba još nije razvila antitijela na virus i ne mogu se otkriti bez višestrukog povećanja broja. Upravo se to može postići provođenjem analize krvi PCR metodom.

Takva dijagnostika je također potrebna za djecu prve godine života rođenu od HIV pozitivne majke. metoda je jedini način pouzdana definicija status djeteta.

PCR za dijagnostiku hepatitisa

Metoda lančane reakcije polimerazom omogućuje otkrivanje DNK virusa hepatitisa A, B, C puno prije stvaranja protutijela na infekciju ili pojave simptoma bolesti. PCR analiza za hepatitis C je posebno učinkovita, budući da je u 85% slučajeva ova bolest asimptomatska i, bez pravodobnog liječenja, prelazi u kronični stadij.



Pravovremeno otkrivanje patogena pomoći će u izbjegavanju komplikacija i dugotrajnom liječenju.

Sveobuhvatni PCR pregled

Sveobuhvatna PCR analiza: ispitivanje metodom polimerne lančane reakcije, koja uključuje određivanje više vrsta infekcija istovremeno: mycoplasma genitalium, mycoplasma hominis, gardnerella vaginalis, candida, trichomonas, citomegalovirus, herpes tipa 1 i 2, gonoreja, papiloma virus. Cijena takve dijagnostike kreće se od 2000 do 3500 rubalja. ovisno o klinici, korištenim materijalima i opremi, kao io vrsti analize: kvalitativnoj ili kvantitativnoj. Što je potrebno u vašem slučaju - liječnik će odlučiti. U nekim slučajevima dovoljno je samo utvrditi prisutnost patogena, u drugima, na primjer, s HIV infekcijom, kvantitativni titar igra važnu ulogu. Kod dijagnosticiranja svih navedenih uzročnika, pregled se naziva "PCR-12 analiza".

Dešifriranje rezultata analize

Dešifriranje PCR analize nije teško. Postoje samo 2 ljestvice indikatora - "pozitivan rezultat" i "negativan rezultat". Kada se otkrije patogen, liječnici mogu potvrditi prisutnost bolesti s 99% sigurnošću i započeti liječenje pacijenta. Kod kvantitativne metode određivanja infekcije, u odgovarajućem stupcu bit će naznačen brojčani pokazatelj otkrivenih bakterija. Samo liječnik može odrediti stupanj bolesti i propisati potrebno liječenje.



U nekim slučajevima, na primjer, pri određivanju HIV infekcije PCR-om, s negativnim rezultatom, postaje potrebno provesti dodatne preglede kako bi se potvrdili dobiveni pokazatelji.

Gdje uzeti analizu?

Gdje uzeti PCR analizu: u javnoj klinici ili u privatnom laboratoriju? Nažalost, u općinskim zdravstvenim ustanovama oprema i metode često su zastarjele. Stoga je bolje dati prednost privatnim laboratorijima s modernom opremom i visokokvalificiranim osobljem. Osim toga, u privatna klinika puno brže ćete postići rezultate.

U Moskvi mnogi privatni laboratoriji nude PCR analizu za razne infekcije. Na primjer, u takvim klinikama kao što su Vita, Complex Clinic, Happy Family, Uro-Pro, provodi se PCR analiza. Cijena pregleda je od 200 rubalja. za identifikaciju jednog patogena.

Može se zaključiti da je dijagnoza zaraznih bolesti PCR-om u većini slučajeva brz i pouzdan način otkrivanja uzročnika u tijelu u ranim fazama infekcije. Ali ipak, u određenim slučajevima, vrijedi odabrati druge dijagnostičke metode. Samo stručnjak može odrediti potrebu za takvom studijom. Dešifriranje PCR analize također zahtijeva profesionalni pristup. Pridržavajte se uputa liječnika i nemojte uzimati pretrage koje vam nisu potrebne.

Lančana reakcija polimerazom (PCR)- eksperimentalna metoda molekularne biologije, koja je specifična amplifikacija nukleinskih kiselina inducirana sintetskim oligonukleotidnim početnicama in vitro.

Ideja o razvoju PCR metode pripada američkom istraživaču Karyju Mullisu, koji je 1983. stvorio metodu koja je omogućila umnožavanje DNK tijekom cikličkih udvostručenja pomoću enzima DNK polimeraze u umjetnim uvjetima. Nekoliko godina nakon objave ove ideje, 1993. godine, K. Mullis je dobio za nju Nobelova nagrada.

Na početku primjene metode, nakon svakog ciklusa zagrijavanja-hlađenja, u reakcijsku smjesu bilo je potrebno dodati DNA polimerazu, jer se ona brzo inaktivirala na visoka temperatura. Postupak je bio vrlo neučinkovit, zahtijevao je puno vremena i enzima. Godine 1986. značajno je modificiran korištenjem DNA polimeraze iz termofilnih bakterija. Ovi enzimi mogu izdržati mnoge reakcijske cikluse, što vam omogućuje automatizaciju PCR-a. Jedna od najčešće korištenih termostabilnih DNA polimeraza izolirana je iz bakterija. Thermus aquaticus i imenovani Taq-DNA polimeraza.

Suština metode. Metoda se temelji na višestrukom selektivnom kopiranju određene regije DNA pomoću enzima Taq-DNA polimeraze. Lančana reakcija polimeraze omogućuje dobivanje amplifikacija duljine do nekoliko tisuća parova baza. Za povećanje duljine PCR produkta na 20-40 tisuća parova baza koristi se mješavina raznih polimeraza, ali to je još uvijek puno manje od duljine kromosomske DNA eukariotske stanice.

Reakcija se provodi u programabilnom termostatu (pojačalu) - uređaju koji može izvesti dovoljno brzo

hlađenje i zagrijavanje epruveta (obično s točnošću od najmanje 0,1 °C). Pojačala vam omogućuju postavljanje složenih programa, uključujući one s mogućnošću "vrućeg pokretanja" i naknadne pohrane. Za PCR u stvarnom vremenu proizvode se uređaji opremljeni fluorescentnim detektorom. Instrumenti su također dostupni s automatskim poklopcem i odjeljkom za mikropločice, što im omogućuje integraciju u automatizirane sustave.

Obično se tijekom PCR-a provodi 20-45 ciklusa, od kojih se svaki sastoji od tri faze: denaturacije, žarenja primera, elongacije (sl. 6.1 i 6.2). Na sl. 6.1 prikazuje dinamiku promjena temperature u epruveti tijekom PCR ciklusa.

Riža. 6.1. Grafikon promjene temperature u epruveti tijekom jednog ciklusa lančane reakcije polimerazom

Denaturacija šablona DNK provodi se zagrijavanjem reakcijske smjese na 94-96 °C tijekom 5-90 s tako da se lanci DNA rasprše. Treba napomenuti da se prije prvog ciklusa reakcijska smjesa prethodno zagrijava 2-5 minuta kako bi se u potpunosti denaturirala početna matrica, što omogućuje smanjenje količine nespecifičnih produkata reakcije.

Riža. 6.2. Shema prvog ciklusa lančane reakcije polimeraze

Faza žarenja temeljnog premaza. S postupnim smanjenjem temperature, primeri se komplementarno vežu na predložak. Temperatura žarenja ovisi o sastavu temeljnih premaza i obično je 4-5°C niža od izračunate temperature taljenja. Trajanje faze je 5-60 s.

Tijekom sljedeće faze - istezanje- dolazi do sinteze kćerinskog lanca DNA na majčinoj matrici. Temperatura elongacije ovisi o polimerazi. Često korištene Taq i Pfu DNA polimeraze najaktivnije su na 72°C. Vrijeme elongacije, uglavnom ovisno o duljini PCR produkta, tipično je 1 minuta na 1000 parova baza.